Báo cáo khoa học: Acute activation of Erk1/Erk2 and protein kinase B/akt proceed by independent pathways in multiple cell types

Acute Activation Of Erk1/Erk2 And Protein Kinase B/Akt Proceed By Independent Pathways In Multiple Cell Types

Tác giả: Doris Chiu, Kewei Ma, Alexander Scott and Vincent Duronio

Lĩnh vực: Medicine, University of British Columbia and Vancouver Coastal Health Research Institute, Jack Bell Research Centre, Vancouver, Canada

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này xem xét mối quan hệ giữa hai con đường tín hiệu chính: một con đường bắt đầu từ protein p21ras dẫn đến hoạt hóa các protein MAPK p44 Erk1 và p42 Erk2, và con đường kia bắt đầu từ nhóm enzyme phosphatidylinositol 3-kinase (PtdIns3K). Bằng cách sử dụng các chất ức chế PtdIns3K, wortmannin và LY294002, nghiên cứu đã phân tích khả năng của các chất ức chế này trong việc ngăn chặn quá trình phosphoryl hóa protein kinase B/akt (PKB/akt) và quá trình phosphoryl hóa Erk1/2. Kết quả cho thấy, trong hầu hết các loại tế bào được nghiên cứu, quá trình hoạt hóa cấp tính của con đường dẫn đến phosphoryl hóa Erk có thể diễn ra độc lập với hoạt hóa PtdIns3K. Một thử nghiệm sinh học so sánh hai con đường này cho thấy LY294002 gây ra hiện tượng chết tế bào theo chương trình ở các tế bào máu phụ thuộc cytokine, trong khi chất ức chế MEK U0126 ít có tác dụng. Tuy nhiên, khi kết hợp cả hai chất ức chế, chúng có tác dụng hiệp đồng, cho thấy hai con đường này điều hòa các sự kiện hạ lưu khác nhau liên quan đến sự sống sót của tế bào.

Mục lục chi tiết:

• Results and Discussion
• Differential effect of wortmannin and LY294002 on Erk activation in FDC-P1 cells
• Both wortmannin and LY294002 do not affect the activation of Erks in TF-1 cells
• Effect of PtdIns3K inhibitors in BAF-3 cells
• Potential cross-talk in B cells
• Effects of PtdIns3K inhibitors in HEK293 cells
• Effects of PtdIns3K inhibitors in tendon fibroblast cells
• Analysis of inhibitor effects on induction of apoptosis
• Conclusions
• Experimental procedures
• Cells and reagents
• Cell treatments and lysis conditions
• Immunoblotting
• Apoptosis analysis by staining for subdiploid DNA content
• Acknowledgements
• References