Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 250 KB

Giới thiệu nội dung

Steady-state and time-resolved fluorescence studies of conformational changes induced by cyclic AMP and DNA binding to cyclic AMP receptor protein from Escherichia coli

Tác giả: Agnieszka Polit, Urszula Błaszczyk and Zygmunt Wasylewski

Lĩnh vực: Physical Biochemistry, Faculty of Biotechnology, Jagiellonian University, Kraków, Poland

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này sử dụng các phương pháp đo huỳnh quang trạng thái ổn định và phân giải thời gian để khám phá những thay đổi cấu trúc và động lực của protein thụ thể cyclic AMP (CRP) khi liên kết với cyclic AMP (cAMP) và DNA. Các thí nghiệm tập trung vào việc đo hiệu quả chuyển năng lượng cộng hưởng huỳnh quang (FRET) và phân tích suy giảm độ phân cực huỳnh quang để xác định sự thay đổi khoảng cách giữa các miền của protein. Kết quả cho thấy việc liên kết cAMP gây ra những thay đổi cấu trúc đáng kể, dẫn đến sự thu hẹp khoảng cách giữa các miền N-terminal và C-terminal của CRP. Những phát hiện này cung cấp thông tin cấu trúc mới về cơ chế hoạt hóa dị lập thể của protein do cAMP gây ra.

Mục lục chi tiết:

  • Experimental procedures
  • Materials
  • Protein purification
  • Fluorescence labeling of CRP
  • Mapping of modified residues
  • Steady-state fluorescence measurements
  • Time-resolved fluorescence measurements
  • Results
  • Fluorescence labeling of CRP
  • Steady-state fluorescence data
  • Time-resolved fluorescence data
  • Discussion