An optogenetic upgrade for the tet – OFF system

Tác giả: Konrad Müller, Matias D. Zurbriggen, Wilfried Weber

Lĩnh vực: Biotechnology and Bioengineering

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này giới thiệu một phương pháp nâng cấp hệ thống biểu hiện gen Tet-OFF, vốn dựa trên hóa chất, thành một hệ thống có thể điều khiển bằng ánh sáng xanh lam. Các tác giả đã phát triển một chất ức chế dựa trên Med25VBD, được kết hợp với miền thoái hóa B-LID nhạy cảm với ánh sáng xanh lam. Khi có ánh sáng, chất ức chế này sẽ bị phân hủy, cho phép miền kích hoạt VP64 hoạt động và điều khiển biểu hiện gen. Phương pháp này cho phép điều chỉnh biểu hiện gen với độ phân giải không gian và thời gian cao, và có tiềm năng ứng dụng để nâng cấp các hệ thống Tet-OFF hiện có mà không cần thay đổi cấu trúc lớn.

Mục lục chi tiết:

• Abstract
• An Optogenetic Upgrade for the Tet-OFF System
• COMMUNICATION TO THE EDITOR
• BIOTECHNOLOGY BIOENGINEERING
• KEYWORDS: optogenetics; inducible expression; gene switch; TET system
• References
• Supporting Information
• DNA Cloning
• Cell Culture and Transfection
• Illumination Conditions
• Reporter Gene Assays
• Figure 1. Inhibition of VP16-based expression systems by Med25VBD.
• Figure 2. Specificity of Med25VBD.
• Figure 3. Light-regulated inhibition of the Tet-OFF system.