Báo cáo khoa học: Ciz1, a p21Cip1/ Waf1-interacting zinc finger protein and DNA replication factor, is a novel molecular partner for human enhancer of rudimentary homolog

Ciz1, a p21^Cip1/Waf1-interacting zinc finger protein and DNA replication factor, is a novel molecular partner for human enhancer of rudimentary homolog

Tác giả: Anna Łukasik, Katarzyna A. Uniewicz, Marta Kulis and Piotr Kozlowski

Lĩnh vực: Institute of Biochemistry, University of Warsaw, Poland

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày việc khám phá Ciz1 như một đối tác phân tử mới cho enhancer of rudimentary homolog (ERH) của con người. Sử dụng các phương pháp như hệ thống yeast two-hybrid, thử nghiệm GST pull-down và phân tích tandem MS, các nhà nghiên cứu đã chứng minh Ciz1 là một yếu tố tương tác thực sự của ERH. Vùng tương tác của Ciz1 với ERH nằm trong khoảng các residue 531-644, trùng với vị trí gắn p21^Cip1/Waf1. Điều này gợi ý rằng sự tương tác với ERH có thể ngăn cản Ciz1 gắn với p21^Cip1/Waf1. Khi ERH và Ciz1 cùng biểu hiện trong tế bào HeLa, Ciz1 đã đưa ERH đến các vị trí tập trung DNA replication. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng cả ERH và Ciz1 đều được biểu hiện rộng rãi trong các mô của con người, cho thấy khả năng tương tác của chúng có thể phổ biến.

Mục lục chi tiết:

• Keywords: Ciz1; DNA replication; ERH; human; protein-protein interaction
• Correspondence
• Database
• Enhancer of rudimentary homolog (Drosophila) (ERH)
• Abbreviations
• Results
• Figure 1. Interaction between ERH and Ciz1 examined by the yeast two-hybrid assay.
• Figure 2. Interaction between ERH and Ciz1 examined by GST pull-down assays.
• Figure 3. Coexpression of ERH and Ciz1 in HeLa cells.
• Figure 4. Tissue expression profile of Ciz1.
• Discussion
• Experimental procedures
• Yeast two-hybrid screen
• DNA constructs
• pYESTrp2/Ciz1[A-E]
• pEGFP-N1/matrin 3
• pmCherry-N1/Ciz1
• Production and purification of recombinant proteins
• GST pull-down assays
• Cell culture, transfection and fluorescence microscopy
• Array hybridization
• Acknowledgements
• References