Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 200 KB

Giới thiệu nội dung

A C31 Integrase-Mediated Integration Hotspot in Favor of Transgene Expression Exists in the Bovine Genome

Tác giả: Hai-Long Ou, Ying Huang, Li-Juan Qu, Miao Xu, Jing-Bin Yan, Zhao-Rui Ren, Shu-Zhen Huang and Yi-Tao Zeng
Lĩnh vực: Di truyền học, Sinh học phân tử
Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này xác định sự tồn tại của một điểm nóng tích hợp (integration hotspot) trong bộ gen bò, được gọi là BF4, nơi tích hợp gen ngoại lai diễn ra mạnh mẽ và biểu hiện gen cao khi sử dụng integrase C31. Các nhà nghiên cứu đã xác định hai vị trí pseudo attP mới, BF4 và BF10, trong bộ gen bò, và đánh giá tần suất tích hợp của chúng. BF4 cho thấy tần suất tích hợp cao nhất (74%) và dẫn đến biểu hiện gen GFP cao hơn đáng kể so với BF10 và các vị trí khác. Nghiên cứu cũng đề xuất rằng việc sử dụng điểm nóng BF4 có thể là một chiến lược hiệu quả để tạo ra động vật biến đổi gen có biểu hiện gen mong muốn.
Mục lục chi tiết:

  • Tóm tắt
  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Xác định hai vị trí pseudo attP từ nguyên bào sợi với biểu hiện protein huỳnh quang xanh lục (GFP) cao hoặc thấp
  • Tần suất tích hợp của bốn vị trí pseudo attP
  • Hồ sơ biểu hiện của các gen được tích hợp tại các vị trí pseudo attP khác nhau
  • Thảo luận
  • Thủ tục thực nghiệm
  • Nuôi cấy tế bào nguyên phát
  • Plasmid, chuyển gen và chọn lọc tế bào
  • PCR ngược bán tổ để xác định vị trí
  • Lai tại chỗ huỳnh quang
  • Phân tích PCR các vị trí tích hợp
  • Thử nghiệm biểu hiện GFP đã chuyển gen
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo