The ferredoxin-NADP+ reductase/ferredoxin electron transfer system of Plasmodium falciparum

The ferredoxin-NADP+ reductase/ferredoxin electron transfer system of Plasmodium falciparum

Tác giả: Emanuela Balconi, Andrea Pennati, Danila Crobu, Vittorio Pandini, Raffaele Cerutti, Giuliana Zanetti and Alessandro Aliverti

Lĩnh vực: Khoa học Sinh hóa, Sinh học Phân tử.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào hệ thống truyền electron ferredoxin-NADP+ reductase (FNR) và ferredoxin (Fd) trong apicoplast của ký sinh trùng Plasmodium falciparum. Hệ thống này cung cấp năng lượng khử cần thiết cho quá trình tổng hợp tiền chất isoprenoid, và là mục tiêu tiềm năng cho việc phát triển thuốc chống sốt rét. Nghiên cứu đã thu được ferredoxin và FNR tái tổ hợp của Toxoplasma gondii và P. falciparum. Đặc biệt, cấu trúc tinh thể và các đặc tính chức năng của FNR từ P. falciparum đã được xác định, cho thấy sự khác biệt đáng kể so với các FNR tương đồng khác. Enzyme này thể hiện hiệu quả xúc tác kém hơn và quá trình chuyển hydride chậm hơn, cùng với sự mất ổn định của dạng bán quinone FAD. Một đặc điểm độc đáo khác là khả năng tạo dimer bất hoạt thông qua liên kết disulfide dưới điều kiện oxy hóa, có thể được điều hòa bởi các tác nhân oxy hóa và khử có mặt trong apicoplast.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Tổng hợp gen PfFNR và biểu hiện dị thể
• Phân tích động học trạng thái ổn định của PfFNR
• Dimer cộng hóa trị của PfFNR
• Nghiên cứu động học nhanh về bán phản ứng khử
• Tương tác giữa PfFNR và PfFd
• Thảo luận
• Cấu trúc tinh thể của dimer PfFNR và chi tiết tương tác với 2′-P-AMP
• Thủ tục thực nghiệm
• Xây dựng plasmid
• Biểu hiện quá mức và tinh sạch protein
• Phân tích phổ và động học trạng thái ổn định
• Phân tích sự chuyển đổi giữa các dạng monomer và dimer của PfFNR
• Chuẩn định hoạt độ và quang khử FAD
• Động học nhanh
• Tài liệu tham khảo