Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 184 KB

Giới thiệu nội dung

Recombinant Purple Acid Phosphatase Isoform 3 from Sweet Potato is an Enzyme with a Diiron Metal Center

Tác giả: Teerawit Waratrujiwong, Bernt Krebs, Friedrich Spener, Pornsawan Visoottiviseth

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Khoa học Nông nghiệp

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc đặc trưng hóa isoform 3 của enzyme purple acid phosphatase (spPAP3) từ khoai tây. Sử dụng kỹ thuật tái tổ hợp, enzyme đã được biểu hiện và tinh sạch. Kết quả phân tích cho thấy spPAP3 có một trung tâm kim loại diiron, với sắt là thành phần chính. Sự thay thế kim loại tại vị trí liên kết thứ hai và các đột biến điểm tại Tyr291 đã được thực hiện để khảo sát ảnh hưởng đến hoạt tính xúc tác. Các phát hiện này cung cấp hiểu biết sâu sắc về cấu trúc và chức năng của spPAP3, đặc biệt là vai trò của trung tâm kim loại diiron và các gốc amino acid xung quanh trong hoạt động xúc tác.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Tài liệu liên quan
  • Kết quả và Thảo luận
  • Đặc trưng hóa enzyme tái tổ hợp
  • Đặc trưng phổ học
  • Phân tích ion kim loại giả
  • Trao đổi ion kim loại một phần
  • spPAP3 được tối ưu hóa cho xúc tác với trung tâm diiron?
  • Vật liệu
  • Phân lập cDNA spPAP3 và đột biến điểm
  • Xây dựng virus tái tổ hợp, nuôi cấy tế bào và khuếch đại virus
  • Biểu hiện và tinh sạch spPAP3
  • Xác định protein
  • Nghiên cứu quang phổ và xét nghiệm enzyme
  • Chuẩn bị kháng thể chống lại PAP thực vật
  • SDS/PAGE và điện di đẳng điểm
  • Phân tích ion kim loại
  • Trao đổi ion kim loại một phần
  • Trình tự N-terminal
  • Phân tích ion kim loại
  • Trao đổi ion kim loại một phần
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo