Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: 230 KB

Giới thiệu nội dung

Oligomerization states of the association domain and the holoenzyme of Ca2+/CaM kinase II

Tác giả: Oren S. Rosenberg, Sebastian Deindl, Luis R. Comolli, André Hoelz, Kenneth H. Downing, Angus C. Nairn, and John Kuriyan

Lĩnh vực: Sinh học phân tử và Tế bào, Hóa học, Y sinh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cấu trúc dạng tập hợp của miền liên kết và toàn bộ enzyme của Ca2+/CaM kinase II (CaMKII). CaMKII là một enzyme kinase oligomeric quan trọng tham gia vào nhiều quá trình tế bào. Dữ liệu từ tán xạ ánh sáng và hiển vi điện tử cho thấy toàn bộ enzyme có dạng dodecamer với đối xứng bậc sáu. Tuy nhiên, khi các miền kinase bị loại bỏ, miền liên kết tự tập hợp lại thành dạng tetradecamer với đối xứng bậc bảy. Nghiên cứu này sử dụng các kỹ thuật như hiển vi điện tử, tán xạ ánh sáng và nhiễu xạ tia X để so sánh các trạng thái tập hợp của các miền liên kết riêng biệt và toàn bộ enzyme CaMKII.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
    • Tán xạ ánh sáng tĩnh
    • Toàn bộ enzyme có đối xứng bậc sáu trong các mẫu nhuộm âm tính
    • Các miền kinase tạo thành một vòng thứ hai xung quanh vòng của các miền liên kết
    • Các miền liên kết biểu hiện bằng vi khuẩn tạo thành tập hợp đối xứng bậc bảy trong các mẫu nhuộm âm tính
    • Các miền liên kết chuẩn bị theo nhiều cách kết tinh thành các vòng đối xứng bậc bảy
  • Thảo luận và Kết luận
  • Quy trình thực nghiệm
    • Tinh sạch protein
    • Phân tích hình ảnh 2D
    • Tiêu hóa bằng trypsin và kết tinh
    • Kính hiển vi điện tử
    • Mô hình hóa phân tử
    • Tiêu hóa bằng trypsin và kết tinh
  • Tài liệu tham khảo
  • Tài liệu bổ sung