Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 94 trang
Dung lượng: 2 MB

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu chế tạo kit phát hiện nhanh, chính xác các vi sinh vật độc hại gây ô nhiễm không khí và nước

Tác giả: TS. Nguyễn Thị Ngọc Dao

Lĩnh vực: Khoa học và Công nghệ

Nội dung tài liệu:
Báo cáo tổng kết khoa học và kỹ thuật này trình bày kết quả nghiên cứu về việc chế tạo bộ sinh phẩm (Kit) phục vụ phát hiện nhanh và chính xác các vi sinh vật độc hại gây ô nhiễm môi trường không khí và nước. Đề tài tập trung vào việc phát triển các phương pháp dựa trên kỹ thuật PCR để phát hiện các tác nhân gây bệnh nguy hiểm như vi khuẩn Bacillus anthracis (gây bệnh than), Yersinia pestis (gây bệnh dịch hạch), Vibrio cholerae (gây bệnh tả), Salmonella typhi (gây bệnh thương hàn), và Shigella (gây bệnh lỵ). Nghiên cứu cũng đề cập đến việc thiết kế thiết bị thu thập mẫu vi sinh vật từ môi trường và xây dựng các quy trình sản xuất, sử dụng Kit. Mục tiêu chính là góp phần nâng cao khả năng phát hiện sớm và đối phó kịp thời với các dịch bệnh nguy hiểm, đặc biệt trong bối cảnh an ninh sinh học ngày càng được quan tâm.

Mục lục chi tiết:

  • Danh mục các chữ viết tắt
  • Lời mở đầu
  • Chương 1. Tổng quan tài liệu
    • 1.1. Tình hình bệnh dịch trên thế giới và ở Việt Nam
      • 1.1.1. Bệnh than
      • 1.1.2. Bệnh dịch hạch
      • 1.1.3. Bệnh tả
      • 1.1.4. Bệnh thương hàn
      • 1.1.5. Bệnh lỵ
    • 1.2. Tổng quan về các vi khuẩn gây bệnh
      • 1.2.1. Vi khuẩn Bacillus anthracis gây bệnh than
      • 1.2.2. Vi khuẩn Yersinia pestis gây bệnh dịch hạch
      • 1.2.3. Vi khuẩn Vibrio cholerae gây bệnh tả
      • 1.2.4. Vi khuẩn Salmonella typhi gây bệnh thương hàn
      • 1.2.5. Vi khuẩn gây bệnh lỵ
    • 1.3. Giới thiệu một số phương pháp chẩn đoán vi khuẩn gây bệnh
    • 1.4. Phương pháp luận trong việc sử dụng kỹ thuật PCR để chẩn đoán vi khuẩn gây bệnh
      • 1.4.1. Nguyên lý của phản ứng PCR
      • 1.4.2. Sử dụng kỹ thuật PCR để chẩn đoán một số vi khuẩn gây bệnh
        • Phát hiện vi khuẩn gây bệnh than Bacillus anthracis
        • Phát hiện vi khuẩn gây bệnh dịch hạch Yersinia
        • Phát hiện vi khuẩn gây bệnh tả Vibrio Cholerae
        • Phát hiện vi khuẩn gây bệnh thương hàn S. typhi
        • Phát hiện vi khuẩn gây bệnh lỵ Shigella
  • Chương 2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
    • 2.1. Sinh phẩm
      • 2.1.1. Vi sinh vật
      • 2.1.2. Các cặp mồi
      • 2.1.2. Các Kit tách chiết
    • 2.2. Dụng cụ và hoá chất
      • 2.2.1. Dụng cụ
      • 2.2.2. Hoá chất
      • 2.2.3. Môi trường
    • 2.3. Các phương pháp nghiên cứu
      • 2.3.1. Phương pháp tách chiết ADN từ vi khuẩn
        • Tách chiết ADN từ vi khuẩn B. anthracis
        • Tách chiết ADN tổng số từ vi khuẩn Yersinia pestis
        • Tách chiết ADN plasmid từ vi khuẩn Vibrio cholerae
        • Tách chiết ADN tổng só từ vi khuẩn Yersinia pestis
        • Tách chiết ADN tổng số từ vi khuẩn S. typhi
        • Tách chiết ADN vi khuẩn tổng số của Shigella spp.
      • 2.3.2. Phương pháp PCR để xác định gen trong vi khuẩn
        • Xác định các gen của Bacillus anthracis
        • Xác định các gen pla của Yersinia pestis
        • Xác định các gen của Vibrio Cholerae
        • Xác định gen vipR của Salmonella typhi
        • Xác định các gen của Shigella
      • 2.3.3. Phương pháp tạo Kit phát hiện các vi khuẩn gây bệnh
      • 2.3.4. Phương pháp xác định độ nhạy của Kit
      • 2.3.5. Phương pháp thu mẫu vi khuẩn từ nước và không khí
      • 2.3.6. Một số phương pháp khác
  • Chương 3. Kết quả và thảo luận
    • 3.1. Tách chiết ADN từ vi khuẩn
      • 3.1.1. Tách chiết ADN từ vi khuẩn Yersinia pestis
      • Tách chiết ADN tổng số
      • Tách chiết ADN plasmid
      • 3.1.2. Kết quả tách chiết ADN tổng số từ vi khuẩn Vibrio cholerae
      • 3.1.3. Kết quả tách chiết ADN tổng số từ vi khuẩn S. typhi
      • 3.1.4. Tách chiết ADN vi khuẩn từ mẫu nước tự nhiên
    • (3.2. Xác định các gen đặc hiệu cho vi khuẩn bằng phương pháp PCR
      • 3.2.1. Xác định các gen virA, capA, pag từ vi khuẩn B. anthracis
      • 3.2.2. Xác định gen pla từ vi khuẩn Y. Pestis
      • 3.2.3. Xác định các gen mã hoá Enterotoxin, Hemolysin và Malate dehydrogenaza từ Vibrio cholerae
      • 3.2.4. Xác định gen vipR từ vi khuẩn S. typhi
      • 3.2.5. Xác định các gen từ vi khuẩn Shigella
    • 33. Xây dựng quy trình chế tạo và sử dụng Kit phát hiện vi khuẩn
      • 3.3.1. Quy trình chế tạo Kit
      • 3.3.2. Quy trình sử dụng các bộ Kit
        • Quy trình sử dụng BacKit để phát hiện Bacillus anthracis
        • Quy trình sử dụng YerKit để phát hiện Yersinia pestis
        • Quy trình sử dụng VibKit để phát hiện Vibrio cholerae
        • Quy trình sử dụng SalKit để phát hiện Salmonella typhi
        • Quy trình sử dụng ShiKit để phát hiện Shigella spp.
    • (3.4. Đánh giá độ nhạy của các bộ Kit
      • 3.4.1. Đánh giá độ nhạy của KitBac
      • 3.4.2. Đánh giá độ nhạy của YerKit
      • 3.4.3. Đánh giá độ nhạy của VibKit
      • 3.4.4. Đánh giá độ nhạy của SalKit
      • 3.4.5. Đánh giá độ nhạy của ShiKit
    • 3.5.1. Chế tạo các thiết bị thu vi khuẩn
    • 3.5.2. Xây dựng quy trình phát hiện vi khuẩn gây bệnh từ nước và không khí
    • 3.6. Sử dụng các bộ Kit để phát hiện vi khuẩn gây bệnh trong phòng thí nghiệm
    • 3.7. Một số kết quả khác đã đạt được của đề tài
      • 3.7.1. Phân lập và phân loại Bacillus anthracis
      • 3.7.2. Tách dòng và đọc trình tự đoạn ADN của gen pla ở Y. Pestis
      • 3.7.3. Xác định trình tự gen mã hoá Enterotoxin, Hemolysin và Malate dehydrogenaza từ vi khuẩn tả Vibrio Cholerae
      • 3.7.4. Đào tạo và các công trình đã công bố
      • 3.7.5. Kinh phí
  • Chương 4. Kết luận
  • Tài liệu tham khảo
  • Phụ lục 1: Phân lập và phân loại Bacillus anthracis
  • Phụ lục 2: Dòng hoá và giải trình trình tự gen pla của Y. Pestis
  • Phụ lục 3. Kết quả xác định trình tự gen mã hoá Enterotoxin, Hemolysin và Malate dehydrogenaza từ vi khuẩn tả Vibrio cholerae