Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Plasticity of laccase generated by homeologous recombination in yeast

Tên đề tài: Plasticity of laccase generated by homeologous recombination in yeast

Tác giả: Angela M. Cusano, Yasmina Mekmouche, Emese Meglecz, Thierry Tron

Lĩnh vực: Biosciences, Institut des Sciences Moléculaires de Marseille, ISM2 CNRS UMR 6263, Marseille Cedex 20, France

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc tạo ra các enzyme laccase lai bằng phương pháp tái tổ hợp song song (homeologous recombination) trên nấm men. Các trình tự mã hóa laccase với độ tương đồng 65-71% đã được sắp xếp lại trong vivo. Kết quả là tạo ra ba enzyme laccase lai (LAC131, LAC232 và LAC535) có khả năng sửa chữa các plasmid tuyến tính hóa thông qua tái tổ hợp song song. Các enzyme lai này cho thấy các thông số động học ở pH axit không khác biệt đáng kể so với enzyme tham chiếu (LAC3). Tuy nhiên, khả năng chịu đựng pH của các enzyme lai đã được mở rộng đáng kể về phía pH kiềm. Đặc biệt, enzyme LAC131 cho thấy sự gia tăng hoạt tính kcat gấp 31 lần ở pH 8 so với enzyme LAC3, đây là một trong những mức tăng cao nhất từng quan sát được đối với laccase sau một bước biến đổi đơn lẻ.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Homeologous recombination of laccase-encoding sequences
  • Expression, purification and characterization of the laccase hybrids
  • Kinetic results
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Molecular models
  • Acknowledgements
  • References