Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 186 KB

Giới thiệu nội dung

Heavy metal ions inhibit molybdoenzyme activity by binding to the dithiolene moiety of molybdopterin in Escherichia coli

Tác giả: Meina Neumann and Silke Leimkühler

Lĩnh vực: Proteinanalytics, Institute of Biochemistry and Biology, University of Potsdam, Germany

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cách các ion kim loại nặng, bao gồm đồng, cadmium và arsenit, có thể liên kết với phần dithiolene của molybdopterin (MPT) trong các enzyme molybdo trong Escherichia coli. Các kim loại này xâm nhập vào MPT một cách không đặc hiệu, dẫn đến việc ức chế hoạt động của enzyme, đặc biệt là sulfite oxidase. Ngược lại, các enzyme chứa cofactor bis-MGD, như dimethylsulfoxide reductase, dường như được bảo vệ khỏi sự xâm nhập kim loại không đặc hiệu này nhờ một bước kiểm soát chất lượng bổ sung trong quá trình sinh tổng hợp. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ vai trò của các protein MoeA và MogA trong việc gắn molybden đặc hiệu và cho thấy rằng sự xâm nhập kim loại không đặc hiệu xảy ra sau bước tổng hợp MPT.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Molybdenum insertion into the dithiolene group on the 6-alkyl side-chain of molybdopterin
  • Molybdenum is the only second-row transition metal that is required by most living organisms
  • Abbreviations
  • Moco biosynthesis has been studied extensively in Escherichia coli
  • In contrast, cadmium is soluble as its bivalent cation Cd2+
  • Vanadium is chemically similar to molybdenum
  • In this report, we examined the in vivo and in vitro incorporation of metal ions
  • Analysis of metal insertion into R. sphaeroides dimethylsulfoxide reductase
  • Metal insertion into purified hSO in vitro
  • Release of MPT bound to MPT synthase by metal ions
  • Discussion
  • Model for the specific and nonspecific insertion of metal ions during Moco biosynthesis in E. coli
  • Experimental procedures
  • Bacterial strains, plasmids, media and growth conditions
  • Cloning, expression and purification of R. capsulatus MoaE and MoaD1
  • Metal analysis by inductively coupled plasma-optical emission spectrometry (ICP-OES)
  • Moco/MPT analysis
  • Enzyme assays
  • In vitro incorporation assays
  • MPT synthase in vitro assays
  • Acknowledgements
  • References