Báo cáo khoa học: Cloning and expression of a tomato cDNA encoding a methyl jasmonate cleaving esterase

Cloning and Expression of a Tomato cDNA Encoding a Methyl Jasmonate Cleaving Esterase

Tác giả: Christiane Stuhlfelder, Martin J. Mueller and Heribert Warzecha

Lĩnh vực: Pharmaceutical Biology, Institute for Biosciences, University of Würzburg, Germany

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và biểu hiện gen mã hóa enzyme esterase phân cắt methyl jasmonate (MeJA) từ cà chua. Enzyme này, được đặt tên là methyl jasmonate esterase (MJE), có khả năng thủy phân MeJA thành jasmonic acid (JA). Các nhà nghiên cứu đã nhân bản thành công cDNA mã hóa MJE, biểu hiện protein tái tổ hợp trong vi khuẩn E. coli và chứng minh hoạt tính xúc tác của nó. Phân tích mức độ biểu hiện mRNA và hoạt tính enzyme trong các mô cà chua khác nhau cho thấy MJE có vai trò tiềm năng trong việc điều hòa tín hiệu jasmonate.

Mục lục chi tiết:

• Experimental procedures
• Plant material
• Nucleic acid isolation and blot analyses
• RT-PCR and cloning of partial- and full-length cDNA
• Overexpression and purification
• Results
• Isolation of MJE CDNA
• Southern blot analysis
• Bacterial expression and purification of tomato MJE
• Northern blot analysis and induction of MJE expression in cell cultures
• Discussion
• Acknowledgements
• References