An Orphan Dermaseptin From Frog Skin Reversibly Assembles To Amyloid-like Aggregates In A pH-dependent Fashion

An Orphan Dermaseptin From Frog Skin Reversibly Assembles To Amyloid-Like Aggregates in a pH-Dependent Fashion

Tác giả: Ruth Gößler-Schöfberger, Günter Hesser, Martin Muik, Christian Wechselberger và Alexander Jilek

Lĩnh vực: Hóa hữu cơ, Khoa học bề mặt và nano, Vi sinh học, Công nghệ nano y sinh.

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này khám phá hành vi tự lắp ráp của peptide dermaseptin PD-3-7 (aDrs) có nguồn gốc từ da ếch, đặc trưng bởi điện tích âm ròng ở pH trung tính. Không giống như hầu hết các dermaseptin khác có tính chất kháng khuẩn, aDrs thể hiện xu hướng hình thành các cấu trúc giống amyloid một cách đảo ngược phụ thuộc vào pH. Ở pH trên 5, các sợi amyloid này sẽ phân rã, một quá trình được cho là do sự khử proton của các nhóm bên và nhóm carboxyl đầu cuối, dẫn đến lực đẩy tĩnh điện giữa các phân tử. Tuy nhiên, trong khoảng pH chuyển tiếp (pH 5-6.5), các tập hợp hạt “ngược dòng” có kích thước từ 10-500 nm được hình thành. Những tập hợp không ổn định này, khi được giải phóng khỏi trạng thái lắng đọng amyloid bởi sự thay đổi pH, có thể gây ra hiệu ứng độc tính mạnh mẽ. Hoạt động này không liên quan đến sự ly giải hoặc can thiệp vào trạng thái oxy hóa khử của tế bào, mà dường như hoạt động thông qua một cơ chế chưa được xác định. Nghiên cứu này giới thiệu một thành viên mới trong nhóm các peptide tự lắp ráp từ da ếch, sở hữu các đặc tính tự tập hợp đặc biệt có khả năng liên quan đến các quá trình sinh học.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Cấu trúc thứ cấp được cảm ứng bởi túi và chất tẩy
• Hoạt tính kháng khuẩn và độc tính của aDrs hòa tan
• Đặc trưng của các tập hợp aDrs
• Sự hình thành sợi là một quá trình đảo ngược phụ thuộc vào pH
• Sắp xếp lại cấu trúc của các tập hợp
• Tập hợp hạt không ổn định được hình thành trong quá trình phân rã
• Các tập hợp hạt tạo ra không gây độc tế bào hoặc tạo ra các loại oxy phản ứng
• Tương quan giữa amyloid và miễn dịch bẩm sinh
• Quy trình thử nghiệm
• Tổng hợp và tinh chế peptide
• SUV
• Quang phổ CD
• Xét nghiệm ThT
• Xét nghiệm Congo Red
• TEM
• FTIR
• Thẩm tách cân bằng
• Xét nghiệm vùng ức chế
• Xét nghiệm ức chế tăng trưởng bằng đường lỏng
• Nuôi cấy tế bào
• Xét nghiệm ức chế MTT
• Xét nghiệm giải phóng LDH
• Xác định các loại oxy phản ứng
• Kính hiển vi huỳnh quang quét laser
• Lời cảm ơn
• Tài liệu tham khảo
• Thông tin hỗ trợ