Báo cáo khoa học: The role of the ESSS protein in the assembly of a functional and stable mammalian mitochondrial complex I (NADH-ubiquinone oxidoreductase)

The Role of the ESSS Protein in the Assembly of a Functional and Stable Mammalian Mitochondrial Complex I (NADH-ubiquinone oxidoreductase)

Tác giả: Prasanth Potluri, Nagendra Yadava, and Immo E. Scheffler

Lĩnh vực: Biology, Molecular Biology Section, University of California, San Diego, California, USA

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của protein ESSS, một tiểu đơn vị mới được xác định của phức hợp I ty thể ở động vật có vú. Phân tích cho thấy protein ESSS là một protein màng tích hợp nhỏ, được định vị trong β-tiểu phức hợp và mã hóa trên nhiễm sắc thể X. Các thí nghiệm với các dòng tế bào hamster Trung Quốc thiếu hụt phức hợp I cho thấy sự vắng mặt của protein ESSS dẫn đến sự ngừng trệ hoàn toàn trong việc lắp ráp và hoạt động của phức hợp I. Việc bổ sung protein ESSS, kể cả khi được gắn thêm các nhãn epitope, đã khôi phục hoạt động của phức hợp I. Nghiên cứu cũng khám phá sự tương tác của ESSS với các tiểu đơn vị khác và sự tương thích giữa các loài trong quá trình lắp ráp phức hợp I.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Experimental procedures
• Cell lines and cell culture
• Plasmids and genes
• Transfections
• Measurement of respiratory activities
• Isolation of mitochondria and mitochondrial fractions
• Immunochemical assays and antibodies
• Blue native polyacrylamide gel electrophoresis (BN/PAGE)
• Other reagents
• Results
• Identification of ESSS as essential accessory subunit
• Characterization of other mutants within same complementation group
• Analysis of complex I assembly and activity
• Heterologous expression of the ESSS-HA subunit
• Partial complex I assembly in different respiration deficient mutants of Chinese hamster cells
• Discussion
• Acknowledgements
• References