Báo cáo khoa học: The role of ADAM10 and ADAM17 in the ectodomain shedding of angiotensin converting enzyme and the amyloid precursor protein

The Role of ADAM10 and ADAM17 in the Ectodomain Shedding of Angiotensin Converting Enzyme and the Amyloid Precursor Protein

Tác giả: Tobias M. J. Allinson, Edward T. Parkin, Thomas P. Condon, Sylva L. U. Schwager, Edward D. Sturrock, Anthony J. Turner, and Nigel M. Hooper

Lĩnh vực: Biochemistry, Microbiology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của các metalloprotease ADAM10 và ADAM17 trong quá trình cắt bỏ miền ngoại bào của enzyme chuyển angiotensin (ACE) và protein tiền chất amyloid (APP). Sử dụng phương pháp oligonucleotide antisense, các nhà nghiên cứu đã đánh giá tác động của việc giảm biểu hiện ADAM10 và TACE (ADAM17) đối với quá trình shedding của ACE và APP trên tế bào SH-SY5Y của con người. Kết quả cho thấy cả hai enzyme này đều tham gia vào quá trình shedding của APP, nhưng không có enzyme nào đóng vai trò trong quá trình shedding của ACE. Hợp chất APMA đã được sử dụng để kích thích quá trình shedding của ACE, nhưng không ảnh hưởng đến APP, cho thấy APMA có thể phân biệt giữa hai quá trình shedding này và có thể kích hoạt một secretase ACE riêng biệt. Nghiên cứu này cung cấp cái nhìn sâu sắc về sự phức tạp của quá trình ectodomain shedding và vai trò của các metalloprotease trong đó.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Cell culture
• Transfection of cells with ASOS
• QRT-PCR
• SDS/PAGE and immunoblot analysis
• ACE assay
• Determination of the secretase cleavage site in soluble ACE
• Statistical analysis
• Results
• Neither ADAM10 nor TACE are responsible for the shedding of ACE
• APMA stimulates the shedding of ACE but not APP
• The APMA-stimulated secretase cleaves ACE at the same Arg-Ser bond as the constitutive secretase
• The APMA-induced secretase can be distinguished from the constitutive ACE secretase by its sensitivity to a hydroxamic acid inhibitor
• Neither TACE nor ADAM10 is responsible for the APMA-induced shedding of ACE
• Discussion
• Acknowledgements
• References