Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 531 KB

Giới thiệu nội dung

Site-Directed Mutagenesis of the Active Site Loop of the Rhodanese-Like Domain of the Human Molybdopterin Synthase Sulfurase MOCS3: Major Differences in Substrate Specificity Between Eukaryotic and Bacterial Homologs

Tác giả: Karsten Krepinsky and Silke Leimkühler

Lĩnh vực: Biochemistry and Biology, University of Potsdam, Germany

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khảo sát vai trò của các gốc amino acid trong vòng lặp vùng hoạt động của miền giống rhodanese thuộc enzyme molybdopterin synthase sulfurase MOCS3 của người. Thông qua kỹ thuật đột biến định hướng, các nhà nghiên cứu đã tìm hiểu về sự khác biệt trong đặc hiệu cơ chất giữa các đồng đẳng ở sinh vật nhân thực và vi khuẩn. Kết quả cho thấy rằng amino acid cuối cùng của vòng lặp vùng hoạt động đóng vai trò quan trọng trong việc xác định tính đặc hiệu với thiosulfate như một nguồn lưu huỳnh. Sự hiện diện của các amino acid mang điện tích dương ở vị trí này, tương tự như trong các đồng đẳng vi khuẩn, làm tăng đáng kể hoạt tính chuyển sulfur của MOCS3-RLD. Ngược lại, aspartate ở vị trí này trong MOCS3 của người có thể là sự thích ứng với nguồn sulfur sinh lý của con người, có khả năng là L-cysteine desulfurase, chứ không phải là thiosulfate. Nghiên cứu cũng cung cấp cái nhìn sâu sắc về sự tiến hóa của các đồng đẳng MoeB và sự xuất hiện độc lập của MoeZ trong vi khuẩn.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả và Thảo luận
  • Đột biến định hướng của vòng lặp vùng hoạt động của MOCS3-RLD
  • Phân tích ảnh hưởng của các gốc bảo tồn ở C-terminus của MOCS3-RLD lên hoạt tính chuyển sulfur thiosulfate
  • Phân tích vòng lặp vùng hoạt động của vi khuẩn khử thiosulfate
  • Phân tích ảnh hưởng của các biến thể vùng hoạt động MOCS3-RLD lên chuyển sulfur tới MPT synthase
  • Phân tích phát sinh chủng loại của các đồng đẳng MoeB
  • Nguồn gốc của MoeZ trong vi khuẩn
  • Thí nghiệm
  • Quy trình nhân bản, biểu hiện và tinh sạch các biến thể MOCS3-RLD
  • Các xét nghiệm enzyme
  • Các phản ứng MPT synthase
  • Phân tích dữ liệu phát sinh chủng loại
  • Tài liệu tham khảo