Báo cáo khoa học: Purification and structural analysis of the novel glycoprotein allergen Cyn d 24, a pathogenesis-related protein PR-1, from Bermuda grass pollen

Purification and Structural Analysis of the Novel Glycoprotein Allergen Cyn d 24, a Pathogenesis-Related Protein PR-1, from Bermuda Grass Pollen

Tác giả: Lu-Ping Chow, Li-Li Chiu, Kay-Hooi Khoo, Ho-Jen Peng, Sue-Yee Yang, Shih-Wen Huang, and Song-Nan Su

Lĩnh vực: Hóa sinh, Miễn dịch học, Dị ứng học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập, xác định cấu trúc và đặc điểm phân tử của một glycoprotein mới có tên là Cyn d 24, là một dị nguyên tiềm năng có nguồn gốc từ phấn hoa cỏ Bermuda (BGP). BGP chứa một hỗn hợp phức tạp các dị nguyên, trong đó Cyn d 24 là một trong những dị nguyên gây phản ứng IgE ở một tỷ lệ đáng kể bệnh nhân dị ứng BGP. Nghiên cứu đã sử dụng các kỹ thuật sắc ký tiên tiến để tinh chế dị nguyên này, sau đó tiến hành phân tích cấu trúc bằng phương pháp khối phổ MALDI-TOF và xác định trình tự axit amin. Kết quả cho thấy Cyn d 24 là một protein thuộc họ protein liên quan đến bệnh (pathogenesis-related protein) nhóm 1 (PR-1), một phát hiện mới trong lĩnh vực dị nguyên phấn hoa. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ cấu trúc carbohydrate của Cyn d 24, cho thấy nó chứa một chuỗi oligosaccharide N-liên kết đặc trưng, có thể đóng vai trò quan trọng trong phản ứng miễn dịch.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Purification of allergen Cyn d 24
• Lectin-binding activity of Cyn d 24
• Allergenicity of native Cyn d 24
• Partial amino acid sequencing of Cyn d 24
• Cloning and sequencing of cDNA encoding Cyn d 24
• Oligosaccharide analyses
• Discussion
• Experimental procedures
• Purification of nCyn d 24
• SDS/PAGE, immunoblotting and periodic acid Schiff stain
• Lectin-binding assays
• Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
• Proteolytic treatment and amino acid sequence analysis
• PCR-based cloning strategy of Cyn d 24 cDNA
• Glycopeptide identification and analysis
• Acknowledgements
• References