Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 6 trang
Dung lượng: 157 KB

Giới thiệu nội dung

Purification and functional characterization of insecticidal sphingomyelinase C produced by Bacillus cereus

Tác giả: Hisashi Nishiwaki, Katsuhiko Ito, Katsuhiko Otsuki, Hiroyuki Yamamoto, Koichiro Komai and Kazuhiko Matsuda

Lĩnh vực: Agricultural Chemistry, Faculty of Agriculture, Kinki University, Nara, Japan

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và đặc tính hóa một protein có khả năng diệt côn trùng do vi khuẩn Bacillus cereus sản xuất, được tìm thấy trong ấu trùng của Myrmeleon bore. Protein này, được xác định là sphingomyelinase C (SMC), có khả năng gây tê liệt và giết chết gián Đức (Blattela germanica) khi tiêm. Nghiên cứu đã tiến hành tinh chế SMC từ dịch nuôi cấy của B. cereus, chứng minh hoạt tính diệt côn trùng của nó. Một phiên bản tái tổ hợp của SMC được biểu hiện trong E. coli cho thấy hiệu lực tương đương với protein tự nhiên. Thông qua các thử nghiệm đột biến có định hướng, mối liên hệ chặt chẽ giữa hoạt tính phân hủy phospholipid và khả năng diệt côn trùng của SMC đã được làm rõ, cho thấy rằng hoạt động phân hủy phospholipid có thể là cơ chế chính gây độc tính nhanh chóng đối với côn trùng.

Mục lục chi tiết:

  • Isolation of the bacteria from antlion M. bore and preparation of the culture broth
  • Identification of B. cereus
  • Heat shock and proteinase treatments of the culture broth of B. cereus
  • Purification of a toxic protein produced by B. cereus
  • Sequencing of the proteinous toxin produced by B. cereus
  • Cloning and sequencing of the insecticidal toxin (SMC) gene of B. cereus
  • Functional expression of the insecticidal toxin (SMC) in E. coli
  • Site-directed mutagenesis
  • Assay of sphingomyelinase activity
  • Results and discussion
  • Acknowledgements
  • References