Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 137 trang
Dung lượng: 2 MB

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu tăng cường biểu hiện gen mã hóa enzyme DAT tham gia tổng hợp alkaloid ở cây dừa cạn (Catharanthus roseus (L.) G. Don )

Tác giả: Bùi Thị Hà

Lĩnh vực: Sinh học

Nội dung tài liệu:

Luận án này tập trung vào việc nghiên cứu tăng cường biểu hiện gen mã hóa enzyme DAT (Deacetylvindoline-4-O-acetyltransferase) trong cây dừa cạn (Catharanthus roseus (L.) G. Don). Enzyme DAT đóng vai trò then chốt trong chuỗi chuyển hóa tổng hợp alkaloid, là tiền chất quan trọng cho các hợp chất có hoạt tính y học như vinblastine và vincristine, được sử dụng trong điều trị ung thư. Do hàm lượng các alkaloid này trong dừa cạn tự nhiên thấp, nghiên cứu này tìm cách nâng cao sản lượng bằng cách tăng cường biểu hiện gen DAT. Luận án bao gồm các nội dung: xác định đặc điểm của gen CrDAT và biểu hiện của nó, xây dựng quy trình chuyển gen thành công để tạo ra cây dừa cạn chuyển gen có hàm lượng alkaloid được cải thiện, và đánh giá hiệu quả của các phương pháp chuyển gen.

Mục lục chi tiết:

  • Lời cam đoan
  • Lời cảm ơn
  • Mục lục
  • Danh mục những chữ viết tắt trong luận án
  • Danh mục bảng trong luận án
  • Danh mục hình trong luận án
  • MỞ ĐẦU
    • Đặt vấn đề
    • Mục tiêu nghiên cứu
    • Nội dung nghiên cứu
    • Những đóng góp mới của luận án
    • Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài luận án
  • Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
    • Alkaloid
      • Vai trò của alkaloid thực vật
      • Alkaloid ở cây dừa cạn
    • Sinh tổng hợp alkaloid và hoạt động của enzyme DAT ở cây dừa cạn
      • Quá trình sinh tổng hợp alkaloid ở cây dừa cạn
      • Hoạt động của enzyme DAT và gen DAT
    • Nghiên cứu cải thiện hàm lượng alkaloid ở cây dừa cạn
      • Nâng cao hàm lượng alkaloid ở cây dừa cạn bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật
      • Nâng cao hàm lượng alkaloid bằng kỹ thuật chuyển gen
  • Chương 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
    • Vật liệu nghiên cứu
      • Vật liệu thực vật
      • Chủng vi khuẩn và các loại vector
    • Hóa chất, thiết bị và địa điểm nghiên cứu
      • Hóa chất, thiết bị nghiên cứu
      • Địa điểm nghiên cứu và hoàn thành luận án
    • Phương pháp nghiên cứu
      • Các phương pháp sinh học phân tử
      • Phương pháp thiết kế vector chuyển gen mang cấu trúc chứa gen CrDAT
      • Chuyển cấu trúc mang gen CrDAT vào cây thuốc lá
      • Tái sinh và chuyển gen gus ở cây dừa cạn
      • Chuyển cấu trúc mang gen CrDAT vào cây dừa cạn thông qua A.tumefaciens
      • Phương pháp phân tích cây chuyển gen
      • Phương pháp tính hiệu suất chuyển gen
      • Các phương pháp phân tích, xử lý số liệu
  • Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
    • Đặc điểm của gen CrDAT phân lập từ cây dừa cạn
      • Kết quả tách dòng và xác định trình tự nucleotide của gen CrDAT
      • So sánh trình tự nucleotite của gen CrDAT
    • Thiết kế vector chuyển gen và biểu hiện gen CrDAT trên cây thuốc lá
      • Thiết kế vector chuyển gen mang cấu trúc chứa gen CrDAT
      • Phân tích biểu hiện gen CrDAT trên cây thuốc lá chuyển gen
      • Thảo luận kết quả thiết kế và đánh giá hoạt động của vector chuyển gen pBI121-CrDAT
    • Nghiên cứu hệ thống tái sinh và xây dựng quy trình chuyển gen ở cây dừa cạn
      • Nuôi cấy in vitro cây dừa cạn
      • Xây dựng quy trình chuyển gen thông qua gen gus
      • Kết quả chuyển gen gus vào cây dừa cạn
    • Kết quả chuyển gen CrDAT và tạo cây dừa cạn chuyển gen
      • Chuyển cấu trúc mang gen CrDAT và tái sinh cây dừa cạn chuyên gen
      • Xác định sự có mặt và sự hợp nhất của gen chuyển CrDAT trong hệ gen của các cây dừa cạn chuyển gen ở thế hệ TO
      • Phân tích biểu hiện protein DAT tái tổ hợp ở thế hệ T1
      • Thảo luận về kết quả sự tăng cường biểu hiện gen CrDAT ở cây dừa cạn chuyển gen
  • KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
  • CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIỆN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN
  • TÀI LIỆU THAM KHẢO
  • PHỤ LỤC