Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 230 KB

Giới thiệu nội dung

Molecular Characterization Of Recombinant Mouse Adenosine Kinase and Evaluation As A Target For Protein Phosphorylation

Tác giả: Bogachan Sahin, Janice W. Kansy, Angus C. Nairn, Jozef Spychala, Steven E. Ealick, Allen A. Fienberg, Robert W. Greene, và James A. Bibb

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Dược lý học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và đặc tính hóa hai dạng biến thể của enzyme adenosine kinase (AK) từ não chuột. Các nhà khoa học đã thành công trong việc biểu hiện và tinh sạch các protein tái tổ hợp này, xác định hoạt tính enzyme và các thông số động học của chúng. Nghiên cứu cũng khám phá sự phân bố của AK trong các vùng não và mô ngoại vi khác nhau. Một khía cạnh quan trọng của nghiên cứu là điều tra khả năng điều hòa hoạt động của AK thông qua quá trình phosphoryl hóa protein. Bằng cách sàng lọc một loạt các kinase protein, nhóm nghiên cứu đã xác định rằng protein kinase C (PKC) có thể phosphoryl hóa AK tái tổ hợp. Tuy nhiên, phân tích sâu hơn cho thấy quá trình phosphoryl hóa này xảy ra ở các gốc serine thuộc phần N-terminal của protein, có thể liên quan đến thẻ gắn N-terminal được sử dụng trong quá trình tinh sạch.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
    • Hóa chất và enzyme
    • Nhân dòng phân tử và đột biến định hướng
    • Tinh sạch protein mAK-L và mAK-S
    • Định lượng hoạt độ AK
    • Phân tích Western blot
    • Phản ứng phosphoryl hóa trong ống nghiệm
  • Kết quả
    • Hai dạng biến thể của AK được biểu hiện trong não chuột
    • Hầu hết các mô biểu hiện một dạng AK hơn dạng kia
    • Phân tích chuỗi amino acid
    • Chuẩn bị AK tái tổ hợp hoạt động
    • Phân tích động học
    • Phân tích biểu hiện AK định lượng
    • Đặc tính hóa AK tái tổ hợp
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
    • Phân tích bản đồ peptide phosphoryl hóa và phân tích amino acid phosphoryl hóa
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo