Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 67 trang
Dung lượng: 860 KB

Giới thiệu nội dung

Tách dòng, thiết kế vector và chuyển gen liên quan đến sự tích lũy Asen vào cây thuốc lá

Tác giả: Đào Thu Trang

Lĩnh vực: Sinh học thực nghiệm

Nội dung tài liệu:

Đề tài này tập trung vào việc giải quyết vấn đề ô nhiễm Asen (As) trong môi trường, một vấn đề cấp bách hiện nay do hoạt động công nghiệp gây ra. Asen là một nguyên tố độc hại, gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe con người và hệ sinh thái. Nghiên cứu này đề xuất sử dụng công nghệ sinh học, cụ thể là công nghệ gen, để tạo ra cây thuốc lá có khả năng hấp thụ và tích lũy Asen. Quá trình nghiên cứu bao gồm việc tách dòng gen arsC từ cây dương xỉ Pityrogramma calomelanos, thiết kế vector chuyển gen và thực hiện chuyển gen này vào cây thuốc lá. Mục tiêu là phát triển một giải pháp khoa học và thực tiễn nhằm cải tạo môi trường, góp phần giảm thiểu tác hại của Asen.

Mục lục chi tiết:

  • Lời cảm ơn
  • Mục lục
  • Danh mục chữ viết tắt
  • Danh mục hình
  • Danh mục bảng
  • Mở đầu
  • Chương 1: Tổng quan tài liệu
    • 1. Tổng quan về tình hình ô nhiễm KLN
      • 1.1. Tình hình ô nhiễm KLN trên thế giới
      • 1.2. Tình hình ô nhiễm kim loại nặng ở Việt Nam
    • 2. Tổng quan chung về Asen
      • 2.1. Asen và độc tính của asen
      • 2.2. Sự phơi nhiễm Asen
    • 3. Các phương pháp xử lý ô nhiễm KLN
      • 3.1. Phương pháp truyền thống
        • 3.1.1. Phương pháp cơ học
        • 3.1.2. Phương pháp vật lý và hoá học
      • 3.2. Công nghệ xử lý KLN trong đất bằng thực vật
      • 3.3. Các nghiên cứu về biện pháp xử lý KLN bằng thực vật sử dụng công nghệ gen
    • 4. Chuyển gen ở thực vật
      • 4.1. Cơ sở khoa học của chuyển gen thực vật
      • 4.2. Giới thiệu chung về vector sử dụng trong chuyển gen thực vật
        • 4.2.1. Các hệ thống vector sử dụng trong chuyển gen thực vật
  • Chương 2: Nội dung, vật liệu và phương pháp nghiên cứu
    • 2.1. Nội dung nghiên cứu
    • 2.2. Vật liệu nghiên cứu
      • 2.2.1. Nguyên vật liệu
      • 2.2.2. Hóa chất và thiết bị
        • 2.2.2.1. Hóa chất
        • 2.2.2.2. Thiết bị
      • 2.2.3. Môi trường nuôi cấy
    • 2.3. Phương pháp nghiên cứu
      • 2.3.1. Nuôi cấy và lưu giữ chủng khuẩn
      • 2.3.2. Phương pháp tách ARN
      • 2.3.3. Phương pháp tổng hợp cDNA
      • 2.3.4. Phương pháp xử lý với enzym giới hạn
      • 2.3.5. Phương pháp biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào E.coli
      • 2.3.6. Phương pháp tách chiết và tinh sạch DNA plasmid của vi khuẩn E.coli
      • 2.3.7. Phương pháp biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào A. tumefaciens bằng xung điện
      • 2.3.8. Phương pháp chuyển gen vào thuốc lá thông qua A. tumefaciens (theo Topping, 1998 )
      • 2.3.9. Phương pháp tách chiết DNA tổng số từ thuốc lá
  • Chương 3: Kết quả nghiên cứu
    • 3.1. Tách dòng gen arsC từ RNA của cây dương xỉ Pityrogramma calomelanos
      • 3.1.1. Kết quả tách chiết RNA tổng số
      • 3.1.2. Phản ứng RT-PCR
      • 3.1.3. Biến nạp cấu trúc gen arsC vào vector tách dòng pBT
      • 3.1.4. Kiểm tra vector pBT-arsC
      • 3.1.5. Xác định trình tự gen trình tự gen arsC
    • 3.2. Thiết kế vector chuyển gen mang cấu trúc gen arsC
      • 3.2.1. Gắn gen arsC vào vector biểu hiện pCambia 1301
      • 3.2.2. Kết quả kiểm tra vector pCambia 1301-arsC
    • 3.3. Biến nạp vector chuyển gen pCambia 1301-arsC vào chủng vi khuẩn A. tumefaciens C58
    • 3.4. Tạo cây thuốc lá chuyển gen mang gen arsC
    • 3.5. Kiểm tra cây chuyển gen bằng PCR
  • Kết luận và kiến nghị
  • Tài liệu tham khảo
  • Phụ lục