Báo cáo khoa học: Interaction and functional association of protein disulfide isomerase with aVb3 integrin on endothelial cells

Interaction and Functional Association of Protein Disulfide Isomerase with α_vβ₃ Integrin on Endothelial Cells

Tác giả: Maria Swiatkowska, Jacek Szymański, Gianluca Padula and Czeslaw S. Cierniewski

Lĩnh vực: Department of Molecular and Medical Biophysics, Medical University, Lodz, Poland

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của Protein Disulfide Isomerase (PDI) trong việc điều chỉnh hoạt động của thụ thể integrin α_vβ₃ trên tế bào nội mô. Kết quả cho thấy PDI liên kết với α_vβ₃ trên bề mặt tế bào nội mô khi có mặt ion Mn²⁺, dẫn đến sự xuất hiện các nhóm thiol tự do và sự chuyển đổi của integrin sang trạng thái có ái lực cao với phối tử. Sự hình thành phức hợp PDI-α_vβ₃ này là yếu tố then chốt cho quá trình hoạt hóa integrin, được chứng minh bằng việc PDI ức chế sự gắn kết của vitronectin và LM609. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng quá trình này liên quan đến sự trao đổi các liên kết disulfide và là một cơ chế điều hòa mới cho integrin.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Adhesive properties of endothelial cells are influenced by the thioldisulfide balance.
• Abbreviations
• Association of PDI with α_vβ₃
• Results
• Association of PDI with α_vβ₃ in endothelial cells
• Ligand-binding activity of α_vβ₃ in Mn²⁺-stimulated endothelial cells
• Figure 1. Stimulation of endothelial cells with Mn²⁺ results in the appearance of free thiol groups in α_vβ₃ and PDI.
• Figure 2. Stimulation of endothelial cells with Mn²⁺ exposes binding sites for vitronectin and mAb 609.
• Figure 3. Increased binding of vitronectin and LM609 to Mn²⁺-stimulated endothelial cells requires free thiols in α_vβ₃ and active PDI.
• Table 1. Differential effect of antibodies and PCMBS on binding of vitronectin to endothelial cells activated with Mn²⁺.
• PDI-α_vβ₃ complex formation
• Figure 4. PDI forms a complex with α_vβ₃ in vivo and in vitro.
• Table 2. Rate constants for binding of PDI to α_vβ₃.
• Discussion
• Experimental procedures
• Reagents
• EA. hy926 cell culture
• Purification of platelet PDI and antibodies to PDI
• PDI assay
• Construction and transfection of PDI
• Flow cytometry
• Coimmunoprecipitation experiments
• Confocal microscopy
• Sulfhydryl group labeling
• Surface plasmon resonance
• Acknowledgements
• References