Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: 291 KB

Giới thiệu nội dung

Identification Of Three Proteins That Associate In Vitro With The Leishmania (Leishmania) amazonensis G-Rich Telomeric Strand

Tác giả: Maribel F. Fernández, Rafael R. Castellari, Fábio F. Conte, Fábio C. Gozzo, Adão A. Sabino, Hildete Pinheiro, José C. Novello, Marcos N. Eberlin and Maria I. N. Cano

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Di truyền học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và đặc tính hóa ba phức hợp protein-DNA, được gọi là LaGT1, LaGT2 và LaGT3, có khả năng liên kết với chuỗi G giàu telomere của Leishmania (Leishmania) amazonensis trong ống nghiệm. Các phức hợp này đã được tinh sạch từ các chiết xuất S100 và chiết xuất nhân của L. amazonensis bằng phương pháp sắc ký trao đổi anion và sắc ký ái lực. Phân tích khối phổ đã xác định các thành phần protein của LaGT2 và LaGT3 là các protein tương tự Rbp38p và Rpa1, trong khi thành phần protein của LaGT1 có vẻ là một protein mới của Leishmania. Nghiên cứu cũng khám phá sự đặc hiệu liên kết của các phức hợp này với các chuỗi DNA telomere khác nhau và ảnh hưởng của nồng độ muối đến sự ổn định của chúng.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
    • Nuôi cấy ký sinh trùng
    • Chiết xuất S100 và chiết xuất nhân của L. amazonensis
    • Chuẩn bị các oligo DNA sợi đơn, chuỗi bộ phận với đuôi G 3′ và DNA telomere sợi đôi
    • Phân tích dịch chuyển điện di của các phức hợp protein-DNA
    • Thử nghiệm cạnh tranh
    • Phân tích thống kê
    • Phân hủy Proteinase K
    • Ảnh hưởng của nồng độ muối
    • Thử nghiệm liên kết chéo bằng tia cực tím
  • Kết quả
    • Ba phức hợp protein-DNA liên kết in vitro với chuỗi G giàu telomere của L. amazonensis
    • Tính đặc hiệu của LaGT1 đối với chuỗi G giàu telomere của L. amazonensis
    • Tinh sạch và nhận dạng khối phổ của các phức hợp LaGT tạo protein
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo