Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 191 KB

Giới thiệu nội dung

Hypoxia Reduces the Expression of Heme Oxygenase-2 in Various Types of Human Cell Lines: A Possible Strategy for the Maintenance of Intracellular Heme Level

Tác giả: Yongzhao Zhang, Kazumichi Furuyama, Kiriko Kaneko, Yuanying Ding, Kazuhiro Ogawa, Miki Yoshizawa, Masaki Kawamura, Kazuhisa Takeda, Tadashi Yoshida, and Shigeki Shibahara

Lĩnh vực: Molecular Biology and Applied Physiology, Molecular Pharmacology, Biochemistry

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá tác động của tình trạng thiếu oxy (hypoxia) lên biểu hiện của heme oxygenase-2 (HO-2) trong các dòng tế bào người khác nhau. Kết quả cho thấy tình trạng thiếu oxy làm giảm đáng kể mức độ biểu hiện của mRNA và protein HO-2. Ngược lại, biểu hiện của heme oxygenase-1 (HO-1) có sự biến đổi tùy thuộc vào loại tế bào. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng tình trạng thiếu oxy làm giảm thời gian bán hủy của mRNA HO-2, góp phần vào sự suy giảm biểu hiện của HO-2. Quan trọng hơn, nồng độ heme nội bào tăng lên dưới điều kiện thiếu oxy, cho thấy rằng sự suy giảm biểu hiện của HO-2 có thể là một cơ chế thích ứng để duy trì mức độ heme nội bào.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Results
  • Effects of hypoxia on HO-1 and HO-2 expression in human cell lines
  • Hypoxia decreases the expression levels of HO-2 protein in YN-1 and K562 cells
  • Hypoxia decreases HO activity in YN-1, K562 and HepG2 cells
  • Opposite effects of hypoxia on expression of HO-1 and HO-2 mRNA in YN-1 cells
  • Stability of HO-1 and HO-2 mRNA under hypoxia
  • Functional analysis of the HO-1 and HO-2 gene promoters under hypoxia
  • Hypoxia increases cellular heme contents in human cell lines
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Cell culture and hypoxia study
  • Northern blot analysis
  • Western blot analysis
  • Assay for HO catalytic activity
  • Effects of actinomycin D on the expression of HO-1 and HO-2 mRNA
  • Identification of 5′ end of HO-2 mRNA and the promoter region of the HO-2 gene
  • Luciferase reporter constructs
  • Transient transfection assays
  • Fluorometric assay of heme
  • Acknowledgements
  • References