Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 228 KB

Giới thiệu nội dung

Emerin Binding to Btf, a Death-Promoting Transcriptional Repressor, Is Disrupted by a Missense Mutation That Causes Emery-Dreifuss Muscular Dystrophy

Tác giả: Tokuko Haraguchi, James M. Holaska, Miho Yamane, Takako Koujin, Noriyo Hashiguchi, Chie Mori, Katherine L. Wilson, and Yasushi Hiraoka

Lĩnh vực: Sinh hóa, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối liên hệ giữa protein màng nhân emerin và Btf, một yếu tố ức chế phiên mã thúc đẩy quá trình chết tế bào. Mất chức năng emerin gây ra bệnh loạn dưỡng cơ Dystrophy cơ-Emery-Dreifuss liên kết nhiễm sắc thể X. Thông qua sàng lọc hai lớp lai men, các nhà nghiên cứu đã xác định Btf là một đối tác tương tác của emerin, với ái lực liên kết cân bằng (KD) là 100 nm. Phân tích các đột biến alanine cho thấy các vùng cụ thể của emerin là cần thiết cho sự tương tác này. Quan trọng hơn, hai đột biến gây bệnh trong emerin, S54F và A95-99, đã làm gián đoạn sự liên kết với Btf. Đáng chú ý, đột biến S54F, mặc dù vẫn liên kết bình thường với các đối tác khác như lamin A, lại làm gián đoạn một cách chọn lọc sự liên kết với Btf. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng Btf được định vị lại trong nhân tế bào HeLa khi trải qua quá trình chết theo chương trình do tín hiệu gây chết tế bào, cho thấy vai trò tiềm năng của sự mất liên kết emerin-Btf trong quá trình teo cơ ở bệnh Dystrophy cơ-Emery-Dreifuss.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
    • Tế bào và thuốc thử
    • Sàng lọc hai lớp lai men
    • Xây dựng plasmid
    • Xét nghiệm giếng vi đĩa đo hoạt độ của Btf để liên kết với emerin và đo ái lực
  • Kết quả
    • Sự liên kết của emerin với Btf
    • Phân tích sinh hóa sự liên kết của Btf với emerin
    • Xác định các gốc trong emerin cần thiết cho sự liên kết với Btf
    • Các đột biến gây bệnh S54F và A95-99 làm giảm sự liên kết của emerin với Btf
    • Btf tái định vị từ các cấu trúc “chấm” trong nhân tới các vị trí gần màng nhân trong các tế bào HeLa được xử lý bằng kháng thể Fas (tế bào chết theo chương trình)
  • Thảo luận
    • Chức năng có thể có của Btf
  • Tài liệu tham khảo