Dermaseptin DA4, although closely related to dermaseptin B2, presents chemotactic and Gram-negative selective bactericidal activities

Dermaseptin DA4, Although Closely Related To Dermaseptin B2, Presents Chemotactic And Gram-Negative Selective Bacericidal Activities

Tác giả: Constance Auvynet, Pierre Joanne, Julie Bourdais, Pierre Nicolas, Claire Lacombe, Yvonne Rosenstein

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc mô tả và phân tích đặc tính của một peptide kháng khuẩn mới có tên là Dermaseptin DA4 (DRS-DA4), thuộc họ dermaseptin. Peptide này được phân lập từ da của ếch Mexican Pachymedusa dacnicolor và được xác định ban đầu dựa trên khả năng thu hút tế bào bạch cầu thay vì hoạt tính diệt khuẩn thông thường. Kết quả phân tích cho thấy DRS-DA4 sở hữu hoạt tính thu hút các tế bào bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân một cách định hướng. Điều thú vị là, mặc dù có cấu trúc tương đồng cao với dermaseptin B2 (DRS-B2), DRS-DA4 lại có những đặc tính sinh học khác biệt. Cụ thể, DRS-DA4 chỉ thể hiện hoạt tính kháng khuẩn chọn lọc đối với vi khuẩn Gram âm, đồng thời có khả năng làm tổn thương màng trong của loại vi khuẩn này. Ngược lại, DRS-B2 lại có phổ kháng khuẩn rộng hơn, tác động lên cả vi khuẩn Gram dương và Gram âm. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng hoạt tính thu hút tế bào bạch cầu của DRS-DA4 có thể được trung gian thông qua thụ thể GPCR, cụ thể là FPRL-1, và có liên quan đến con đường tín hiệu ERK1/2 MAPK.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• Isolation, purification and structure of DRS-DA4
• DRS-DA4 induces directional migration of human leukocytes
• DRS-DA4, but not DRS-B2, is only microbicidal for Gram-negative bacteria
• DRS-DA4 interacts preferentially with 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphatidylglycerol (DMPG) vesicles mimicking Gram-negative bacteria
• Discussion
• Experimental procedures
• Frogs
• Purification of the peptide
• ESI-MS, and peptide sequencing by ESI-MS/MS and Edman degradation
• Solid-phase peptide synthesis and purification
• Membrane polarization assay
• Peptide-induced permeabilization of the cytoplasmic membrane of E. coli
• Antimicrobial assays and hemolytic activity
• CD spectroscopy
• DSC and ITC
• Cell preparation and chemotaxis assays
• Cell activation and immunoblot
• Acknowledgements
• References