Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 15 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

An Unusual Plant Triterpene Synthase with Predominant α-Amyrin-Producing Activity Identified by Characterizing Oxidosqualene Cyclases from Malus × domestica

Tác giả: Cyril Brendolise, Yar-Khing Yauk, Ellen D. Eberhard, Mindy Wang, David Chagne, Christelle Andre, David R. Greenwood, Lesley L. Beuning

Lĩnh vực: Sinh học thực vật, Hóa sinh thực vật

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và mô tả đặc điểm các enzyme oxidosqualene cyclase (OSCs) từ cây táo (Malus × domestica), với mục tiêu làm sáng tỏ quá trình sinh tổng hợp triterpene, đặc biệt là các triterpene dạng ursane. Các nhà nghiên cứu đã xác định ba gen OSC có chiều dài đầy đủ từ thư viện biểu hiện gen (EST) của cây táo. Hai trong số các gen này, MdOSC1 và MdOSC3, có trình tự axit amin gần như giống hệt nhau (>99% tương đồng). Kết quả biểu hiện chức năng cho thấy MdOSC1 là một enzyme tổng hợp amyrin hỗn hợp, với tỷ lệ sản xuất α-amyrin so với β-amyrin là 5:1, cho thấy hoạt tính sản xuất α-amyrin chiếm ưu thế đáng kể. Điều này làm cho MdOSC1 trở thành một enzyme tổng hợp α-amyrin có hoạt tính chủ yếu, một đặc điểm không thường thấy ở các enzyme tổng hợp triterpene đa chức năng khác đã biết. Nghiên cứu cũng phân tích biểu hiện gen của các OSC trong các mô khác nhau của cây táo, bao gồm rễ, lá, vỏ quả và thịt quả. Kết quả cho thấy biểu hiện gen cao nhất của các gen OSC này được ghi nhận ở vỏ quả táo, điều này phù hợp với hàm lượng triterpene dạng ursane cao được tìm thấy trong lớp vỏ này. Phân tích phát sinh chủng loại đặt ba trình tự OSC mới này cùng với các OSC triterpene khác, cung cấp cái nhìn sâu sắc về sự tiến hóa của các enzyme này.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả và Thảo luận
  • Phân tích biểu hiện gen của các OSC táo
  • Hàm lượng amyrin và các sản phẩm triterpenoid khác
  • Phân tích phát sinh chủng loại của các OSC táo
  • Kết luận
  • Thủ tục thực nghiệm
  • Quy trình phân tích RNA
  • Quy trình phân tích ghép cặp
  • Biểu hiện thoáng qua ở N. benthamiana
  • Biểu hiện ở nấm men
  • Phân tích GC và GC-MS
  • Phân tích hàm lượng triterpene
  • HPLC
  • MS ghép cặp có độ phân giải cao
  • Tài liệu tham khảo