Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 19 trang
Dung lượng: 315 KB

Giới thiệu nội dung

6-Phosphofructo-2-kinase and Fructose-2,6-bisphosphatase in Trypanosomatidae

Tên đề tài: 6-Phosphofructo-2-kinase and Fructose-2,6-bisphosphatase in Trypanosomatidae

Tác giả: Nathalie Chevalier, Luc Bertrand, Mark H. Rider, Fred R. Opperdoes, Daniel J. Rigden, and Paul A. M. Michels

Lĩnh vực: Sinh hóa, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích đặc điểm phân tử, tìm kiếm trên cơ sở dữ liệu, mô hình hóa và phân tích tiến hóa của các enzyme 6-phosphofructo-2-kinase (PFK-2) và fructose-2,6-bisphosphatase (FBPase-2) trong nhóm sinh vật Trypanosomatidae. Các nhà nghiên cứu đã xác định được bốn gen mã hóa các protein tương đồng với enzyme hai chức năng PFK-2/FBPase-2 ở động vật có vú trong các loài Trypanosoma brucei và Leishmania major, cũng như bốn cặp gen tương tự ở Trypanosoma cruzi. Phân tích cho thấy các protein này có khả năng chỉ hoạt động một chức năng duy nhất. Một trong số các protein PFK-2 ở T. brucei đã được biểu hiện trong E. coli và cho thấy hoạt tính PFK-2 với các đặc tính động học tương tự như enzyme được tinh sạch từ T. brucei. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng các protein PFK-2/FBPase-2 ở trypanosomatid có các phần mở rộng N-terminal dài, trong đó có các motif ankyrin lặp lại, có thể đóng vai trò trong tương tác protein-protein. Phân tích tiến hóa cho thấy bốn isoenzyme PFK-2/FBPase-2 khác nhau ở Trypanosoma và Leishmania có khả năng đã tiến hóa từ một enzyme hai chức năng tổ tiên duy nhất trong dòng dõi trypanosomatid.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Database
  • Abstract
  • Introduction
  • Results and Discussion
  • Purification and characterization of T. brucei PFK-2
  • Database searches and sequence analysis
  • Evolution of PFK-2/FBPase-2
  • Conserved motifs in the N-terminal regions of trypanosomatid PFK-2s
  • Conclusions
  • Experimental procedures
  • Purification of PFK-2 from T. brucei
  • Database searches, sequence alignment, structure modelling and phylogenetic analysis
  • Construction of expression clones, production and purification of recombinant T. brucei PFK-2
  • Protein measurements, SDS/PAGE, western blotting, gel filtration
  • Enzyme assay and kinetic studies
  • Acknowledgements
  • References