Rate, Affinity And Calcium Dependence Of Nitric Oxide Synthase Isoform Binding To The Primary Physiological Regulator Calmodulin

Rate, Affinity and Calcium Dependence of Nitric Oxide Synthase Isoform Binding to the Primary Physiological Regulator Calmodulin

Tác giả: Jonathan L. McMurry, Carol A. Chrestensen, Israel M. Scott, Elijah W. Lee, Aaron M. Rahn, Allan M. Johansen, Brian J. Forsberg, Kyle D. Harris, John C. Salerno

Lĩnh vực: Chemistry & Biochemistry, Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này sử dụng phương pháp cảm biến sinh học dựa trên giao thoa để đo lường sự gắn kết và giải phóng của enzyme nitric oxide synthase tiền liệt (eNOS) và nitric oxide synthase thần kinh (nNOS) với calmodulin (CaM). Kết quả cho thấy sự gắn kết của cả hai dạng enzyme với CaM diễn ra theo khuynh hướng khuếch tán và gần như đạt giới hạn Smoluchowski. Điều này gợi ý rằng định hướng của CaM được tạo điều kiện thuận lợi bởi các nhóm điện tích trên vị trí gắn CaM và bề mặt bổ sung trên CaM. Phosphoryl hóa protein kinase C tại vị trí T495 của eNOS, nằm cạnh vị trí gắn CaM, có thể ngăn chặn hoặc làm chậm đáng kể sự gắn kết của CaM. Các enzyme kinase làm tăng hoạt tính của eNOS không kích thích sự gắn kết của CaM, vốn đã bị giới hạn bởi khuynh hướng khuếch tán. Sự kết hợp giữa sự gắn kết của Ca²⁺ và cân bằng CaM/NOS liên kết ái lực của CaM đối với NOS với sự phụ thuộc vào Ca²⁺ của sự gắn kết CaM. Sự thay đổi về độ nhạy của Ca²⁺ trong sự gắn kết CaM luôn ngụ ý sự thay đổi trong ái lực NOS-CaM. Nghiên cứu này đang được mở rộng bằng cách sử dụng các dạng đột biến để làm sáng tỏ vai trò của các yếu tố cấu trúc riêng lẻ trong quá trình gắn kết và giải phóng.

Mục lục chi tiết: