Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 163 KB

Giới thiệu nội dung

Comparison of native and recombinant chlorite dismutase from Ideonella dechloratans

Tác giả: Helena Danielsson Thorell, Natascha H. Beyer, Niels H. H. Heegaard, Marcus Öhman, and Thomas Nilsson

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này so sánh chi tiết enzyme chlorite dismutase (Cld) tự nhiên từ Ideonella dechloratans với phiên bản tái tổ hợp được sản xuất trong Escherichia coli. Các kết quả cho thấy enzyme tự nhiên có thể đã trải qua một sửa đổi sau dịch mã, có khả năng là liên kết ngang nội phân tử. Sự khác biệt về tính chất điện di và bản đồ peptide sau khi tiêu hóa bằng trypsin giữa hai dạng enzyme đã được quan sát. Phân tích phổ khối lượng của các peptide chỉ ra hai vị trí tiềm năng cho sự sửa đổi trong enzyme tự nhiên, có thể liên quan đến một dipeptide liên kết ngang giữa histidine và tyrosine. Các phương pháp quang phổ và cộng hưởng từ điện tử (EPR) cũng được sử dụng để điều tra sự khác biệt này, gợi ý sự thay đổi trong môi trường của nhóm heme trong enzyme tái tổ hợp. Nghiên cứu đề xuất rằng liên kết ngang có thể ảnh hưởng đến cấu trúc và độ ổn định của enzyme, mặc dù các đặc tính xúc tác dường như tương tự nhau.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and methods
  • Protein purification
  • Peptide mapping by capillary electrophoresis
  • Peptide mass mapping
  • Spectrophotometric titration
  • Electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy
  • Results
  • Electrophoresis of proteins and tryptic peptides
  • Mass spectrometry
  • Spectrophotometric titration of the tyrosines in native chlorite dismutase
  • EPR
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References