Báo cáo Y học: The solution structure and activation of visual arrestin studied by small-angle X-ray scattering

The Solution Structure and Activation of Visual Arrestin Studied by Small-Angle X-ray Scattering

Tác giả: Brian H. Shilton, J. Hugh McDowell, W. Clay Smith and Paul A. Hargrave

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này sử dụng phương pháp tán xạ tia X góc nhỏ (SAXS) để điều tra cấu trúc của arrestin trong dung dịch và các thay đổi cấu trúc xảy ra khi arrestin được hoạt hóa. Kết quả cho thấy arrestin tồn tại dưới dạng dimer trong dung dịch, với hằng số phân ly khoảng 60 µM. Các thay đổi cấu trúc nhỏ, phù hợp với sự di chuyển cục bộ của các vòng lặp hoặc các đầu N- hoặc C- của arrestin, đã được quan sát khi có mặt peptide có chứa gốc photphoryl hóa của rhodopsin và với đột biến R175Q. Những phát hiện này chỉ ra rằng sự hoạt hóa của arrestin liên quan đến những thay đổi cấu trúc tinh tế.

Mục lục chi tiết:

• The solution structure and activation of visual arrestin studied by small-angle X-ray scattering
• Experimental Procedures
• Protein expression and purification
• Protein concentration
• Preparation of the phosphopeptide
• SAXS measurements
• Determination of binding constants from forward scattering
• Radius of gyration, model fitting and analysis
• Results and Discussion
• Arrestin participates in a monomer-dimer equilibrium in solution
• Effect of rhodopsin C-terminal phosphopeptide on arrestin conformation
• The structure of arrestin R175Q resembles that of wild-type arrestin
• Models for the arrestin dimer in solution
• Conclusion
• Acknowledgements
• References