Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 281 KB

Giới thiệu nội dung

Granule-bound Starch Synthase I: A Major Enzyme Involved in the Biogenesis of B-Crystallites in Starch Granules

Tác giả: Fabrice Wattebled, Alain Buléon, Brigitte Bouchet, Jean-Philippe Ral, Luc Liénard, David Delvallé, Kim Binderup, David Dauvillée, Steven Ball and Christophe D’Hulst

Lĩnh vực: Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle, Unité Mixte de Recherche CNRS/USTL, Unité Sous Contrat de l’INRA, Université des Sciences et Technologies de Lille, Institut National de la Recherche Agronomique, Nantes, France.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào enzyme Granule-bound starch synthase I (GBSSI), một nhân tố chính trong quá trình hình thành các tinh thể B trong hạt tinh bột. Thông qua việc phân lập và đặc tính hóa gene STA2 từ Chlamydomonas reinhardtii, các nhà nghiên cứu đã xác định được một enzyme GBSSI có hoạt tính cao hơn đáng kể so với các loại enzyme tương tự ở thực vật bậc cao. Công trình làm sáng tỏ khả năng tổng hợp các cấu trúc tinh thể B một cách đáng kể của GBSSI, dù là kết hợp với các phân tử amylopectin có sẵn hay hình thành hoàn toàn từ vật liệu mới. Nghiên cứu cũng xem xét vai trò của GBSSI trong việc hình thành cấu trúc tinh thể B, cũng như ảnh hưởng của nó đến hình thái và độ kết tinh của hạt tinh bột.

Mục lục chi tiết:

  • Granule-bound starch synthase I
  • Experimental Procedures
  • Materials
  • Chlamydomonas strains, growth conditions and media
  • In vitro synthesis of amylose
  • Separation of starch polysaccharides by gel permeation chromatography
  • In vitro assay of GBSSI activity
  • Antibodies directed against whole starch-bound proteins: Western blots
  • Cloning of the full-length GBSSI cDNA
  • Cloning of the full-length GBSSI gDNA
  • Complementation of the sta2-1 mutation
  • Restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis
  • Scanning electron microscopy
  • X-ray diffraction measurements
  • Results
  • Molecular cloning of cDNA encoding a protein recognized by an antibody directed against granule-associated proteins
  • Characterization of the GBSSI cDNA sequences
  • Characterization of the GBSSI gDNA sequences
  • Establishing the nature of the STA2 locus
  • Amylose in storage starch appears after a block in amylopectin synthesis
  • Discussion
  • References