Báo cáo Y học: Transcriptional activity of interferon regulatory factor (IRF)-3 depends on multiple protein–protein interactions

Transcriptional Activity of Interferon Regulatory Factor (IRF)-3 Depends on Multiple Protein-Protein Interactions

Tác giả: Hongmei Yang, Charles H. Lin, Gang Ma, Melissa Orr, Michael O. Baffi, Marc G. Wathelet

Lĩnh vực: Molecular and Cellular Physiology, Molecular and Cellular Biology

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này khám phá cơ chế hoạt động của yếu tố điều hòa phiên mã IRF-3, một yếu tố quan trọng trong phản ứng miễn dịch bẩm sinh của động vật có xương sống đối với sự xâm nhập của virus. IRF-3 được kích hoạt thông qua quá trình phosphoryl hóa ở đầu C-terminus, dẫn đến sự tích tụ trong nhân, khả năng liên kết với DNA và điều hòa phiên mã các gen mục tiêu. Nghiên cứu chỉ ra rằng hai nhóm dư lượng Ser/Thr riêng biệt tại đầu C-terminus của IRF-3, khi được phosphoryl hóa, hoạt động hiệp đồng để đạt được sự kích hoạt tối đa. Điều đáng chú ý là IRF-3 đã hoạt hóa phiên mã hoàn toàn thông qua việc tuyển dụng các yếu tố đồng hoạt hóa p300/CBP, chứ không tự thân nó có hoạt tính phiên mã nội tại. Sự tương tác giữa IRF-3 và các vùng khác nhau của p300/CBP là cần thiết, và bất kỳ sự gián đoạn nào trong các tương tác này đều dẫn đến mất hoàn toàn hoạt tính phiên mã, cho thấy sự tương tác hai chiều là thiết yếu để tuyển dụng đồng hoạt hóa.

Mục lục chi tiết:

• Transcriptional activity of interferon regulatory factor (IRF)-3 depends on multiple protein-protein interactions
• Keywords: interferon; IRF-3; coactivator; virus; transcription.
• EXPERIMENTAL PROCEDURES
• Plasmid constructs and sequence analysis
• Cell culture and transfections
• In vitro translation, cell extract, EMSA and Western blot
• Pull-down experiments
• RESULTS
• Identifying the residues functionally involved in IRF-3 activation is important both for the characterization of the kinase(s) involved in activation and for our understanding of the activation mechanism.
• Phosphorylation of two distinct groups of Ser/Thr residues is required for virus activation of IRF-3
• IRF-3 activates transcription through CBP recruitment
• Dimerization and DNA-binding activity of IRF-3 mutants
• IRF-3 interacts with multiple domains of the p300/CBP coactivators
• Two distinct regions of IRF-3 are required for interaction with coactivators
• Each of IRF-3’s multiple interactions with coactivators is essential for activity
• DISCUSSION
• Mechanism of IRF-3 activation
• Interaction with a coactivator is essential for IRF-3 transcriptional activity
• CONCLUSIONS
• ACKNOWLEDGEMENTS
• REFERENCES