Báo cáo khoa học: Ras oncogene induces b-galactoside a2,6-sialyltransferase (ST6Gal I) via a RalGEF-mediated signal to its housekeeping promoter

Ras Oncogene Induces β-Galactoside α2,6-Sialyltransferase (ST6Gal I) via a RalGEF-Mediated Signal to Its Housekeeping Promoter

Tác giả: Martin Dalziel, Fabio Dall’Olio, Arron Mungul, Véronique Piller and Friedrich Piller

Lĩnh vực: Sinh hóa học phân tử, Ung thư học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế phân tử mà qua đó protein Ras gây ung thư dẫn đến sự gia tăng hoạt động của enzyme β-galactoside α2,6-sialyltransferase (ST6Gal I). Các nhà nghiên cứu đã xác định rằng tín hiệu Ras, thông qua con đường RalGEF, trực tiếp kích hoạt sự biểu hiện của gen ST6Gal I, đặc biệt là thông qua promoter P3. Sự gia tăng này dẫn đến sự tích lũy mRNA ST6Gal I, hoạt động enzyme ST6Gal I và sự sialyl hóa α2,6 trên bề mặt tế bào. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ vai trò của các promoter khác nhau trong việc điều hòa biểu hiện gen ST6Gal I và nhấn mạnh tầm quan trọng của ST6Gal I trong các quá trình liên quan đến ung thư và di căn.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Vật liệu
• Các bản dựng và đầu dò cDNA
• Phân tích 5′-RACE
• Phân tích RT-PCR của mRNA H-Ras và K-Ras
• Phân tích Northern
• Phân tích hoạt động enzyme sialyltransferase
• Phân tích tế bào bằng máy đo huỳnh quang (FACS)
• Trình tự bộ gen của Siat1
• Kết quả
• Ảnh hưởng của Ras hoạt hóa trên biểu hiện của các thành viên khác nhau của họ sialyltransferase chuột ở tế bào 3T3
• Biểu hiện của Ras gây ung thư làm tăng hoạt động ST6Gal I và sự sialyl hóa α2,6 trên bề mặt tế bào
• Biểu hiện tạm thời có điều kiện của Ras hoạt hóa gây ra sự tích lũy mRNA ST6Gal I
• Tín hiệu H-Ras đến Siat1 chủ yếu thông qua con đường RalGEF
• Ras và K-Ras gây ra sự phiên mã Siat1 thông qua promoter P3 điều hòa chung
• Đóng góp của các exon Q và R vào vùng 5’UT của ST6Gal I mRNA từ các tế bào 3T3 được chuyển đổi Ras
• Bản đồ hóa exon R so với các exon Q và O trong gen Siat1 của chuột
• Thảo luận
• Tài liệu tham khảo