Báo cáo khoa học: nsights into the reaction mechanism of glycosyl hydrolase family 49 Site-directed mutagenesis and substrate preference of isopullulanase

Insights Into the Reaction Mechanism of Glycosyl Hydrolase Family 49 Site-Directed Mutagenesis and Substrate Preference of Isopullulanase

Tác giả: Hiromi Akeboshi, Takashi Tonozuka, Takaaki Furukawa, Kazuhiro Ichikawa, Hiroyoshi Aoki, Akiko Shimonishi, Atsushi Nishikawa, Yoshiyuki Sakano

Lĩnh vực: Applied Biological Science, Biochemistry

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc làm sáng tỏ cơ chế xúc tác của enzyme isopullulanase (IPU) thuộc họ enzyme thủy phân glycosyl (GH) family 49. Mặc dù IPU chỉ thủy phân pullulan và không thủy phân dextran, các enzyme khác trong cùng họ lại có khả năng thủy phân dextran. Bài báo trình bày kết quả của các thí nghiệm biến đổi gen định hướng vị trí (site-directed mutagenesis) và mô hình hóa cấu trúc để xác định các axit amin quan trọng trong hoạt động xúc tác của IPU, đặc biệt là các gốc Trp, Asp và Glu. Nghiên cứu cũng so sánh sở thích cơ chất của IPU với các enzyme dextranase thuộc GH family 49, cho thấy sự tương đồng trong cơ chế xúc tác ở các vị trí âm, bất chấp sự khác biệt về tính đặc hiệu cơ chất. Các kết quả này góp phần làm rõ hơn cơ chế phản ứng của IPU và các enzyme liên quan trong họ GH family 49.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Results and Discussion
• Acknowledgements
• References