Báo cáo khoa học: Molecular cloning, recombinant expression and IgE-binding epitope of x-5 gliadin, a major allergen in wheat-dependent exercise-induced anaphylaxis

Molecular Cloning, Recombinant Expression and IgE-Binding Epitope of ω-5 Gliadin, a Major Allergen in Wheat-Dependent Exercise-Induced Anaphylaxis

Tác giả: Hiroaki Matsuo, Kunie Kohno, Eishin Morita

Lĩnh vực: Da liễu, Dị ứng thực phẩm

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và biểu hiện protein ω-5 gliadin tái tổ hợp, một dị nguyên chính gây ra phản vệ do gắng sức phụ thuộc lúa mì (WDEIA). Các nhà nghiên cứu đã xác định các epitope liên kết IgE mới trong chuỗi chính của protein và biểu hiện một phần protein tái tổ hợp (chuỗi C-terminal) trong vi khuẩn E. coli. Protein tái tổ hợp này đã được chứng minh là có khả năng liên kết IgE, cho thấy tiềm năng của nó như một công cụ chẩn đoán in vitro cho WDEIA. Nghiên cứu cũng thảo luận về tầm quan trọng của việc chuẩn hóa các dị nguyên thực phẩm để chẩn đoán chính xác và những lợi ích tiềm năng của protein tái tổ hợp trong việc này.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Phân lập và biểu hiện protein ω-5 gliadin tái tổ hợp
• Hoạt tính liên kết IgE của protein ω-5 gliadin tự nhiên và tái tổ hợp
• Thảo luận
• Thủ tục thực nghiệm
• Xác định epitope liên kết IgE trong ω-5 gliadin
• Tinh chế ω-5 gliadin từ bột mì
• Trình tự amino acid N-terminal
• Phân lập gen và khuếch đại PCR
• Tổng hợp và giải trình tự sản phẩm PCR
• Biểu hiện và tinh chế protein tái tổ hợp
• SDS/PAGE và immunoblotting
• Miễn dịch học bằng phương pháp chấm (Dot blot) để kiểm tra ức chế
• Tài liệu tham khảo