Báo cáo khoa học: Hatching enzyme of the ovoviviparous black rockfish Sebastes schlegelii – environmental adaptation of the hatching enzyme and evolutionary aspects of formation of the pseudogene

Hatching Enzyme of the Ovoviviparous Black Rockfish Sebastes Schlegelii – Environmental Adaptation of the Hatching Enzyme and Evolutionary Aspects of Formation of the Pseudogene

Tác giả: Mari Kawaguchi, Masahiro Nakagawa, Tsutomu Noda, Norio Yoshizaki, Junya Hiroi, Mutsumi Nishida, Ichiro Iuchi, and Shigeki Yasumasu

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Sinh hóa học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc điều tra enzyme nở của cá hồng đá đen ovoviviparous (Sebastes schlegelii). Enzyme này được phát hiện trong dịch buồng trứng ngay trước giai đoạn nở. Các nhà nghiên cứu đã phân lập và xác định hai loại enzyme HCE (high choriolytic enzyme) từ dịch này. Kết quả cho thấy enzyme nở ở cá hồng đá đen chỉ bao gồm HCE, khác với các loài cá đẻ trứng khác vốn có cả HCE và LCE (low choriolytic enzyme). Biểu hiện của gen HCE ở loài này cũng yếu hơn so với các loài cá xương khác. Điều này được cho là do lớp vỏ trứng của cá hồng đá đen mỏng và dễ vỡ, nên lượng enzyme HCE ít hơn cũng đủ để tiêu hóa vỏ trứng. Nghiên cứu cũng phát hiện năm loại cDNA LCE được ghép nối bất thường, cho thấy sự tiến hóa của gen LCE thành dạng giả gen (pseudogene) do đột biến ở các vùng intron ảnh hưởng đến quá trình ghép nối.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Database
• Results
• Detection of metalloprotease activity in ovarian fluid
• Choriolytic activity in stage 31 ovarian fluid and morphological changes of the chorion
• Identification of HCE from stage 31 ovarian fluid
• Cloning of black rockfish hatching enzyme cDNAs
• Phylogeny
• Gene amplification
• Southern blot analysis
• Northern blot analysis
• Semiquantitative estimation of expression of hatching enzyme genes by RT-PCR
• Whole-mount in situ hybridization
• Discussion
• Experimental procedures
• Fish
• Estimation of caseinolytic activity
• Estimation of MCA-peptide-cleaving activity
• Estimation of choriolytic activity
• Inhibition of enzyme activity
• Electron microscopy
• Identification of SsHCE from ovarian fluid
• Cloning of hatching enzyme cDNAs from black rockfish embryos
• Phylogeny
• Gene amplification
• Southern blot analysis
• Northern blot analysis
• Semiquantitative estimation of expression of hatching enzyme genes by RT-PCR
• Whole-mount in situ hybridization
• Acknowledgements
• References