Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: 1.017 KB

Giới thiệu nội dung

The Emery–Dreifuss Muscular Dystrophy Associated-Protein Emerin Is Phosphorylated on Serine 49 by Protein Kinase A

Tác giả: Rhys C. Roberts, Andrew J. Sutherland-Smith, Matthew A. Wheeler, Ole Norregaard Jensen, Lindsay J. Emerson, Ioannis I. Spiliotis, Christopher G. Tate, John Kendrick-Jones, Juliet A. Ellis

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định các vị trí phosphoryl hóa trên protein emerin, một protein màng nhân có liên quan đến bệnh loạn dưỡng cơ Emery-Dreifuss. Sử dụng các kỹ thuật khối phổ tiên tiến, các nhà nghiên cứu đã xác định được rằng emerin tồn tại dưới dạng nhiều loài được phosphoryl hóa khác nhau. Đặc biệt, họ đã xác định được rằng serine 49 (S49) là một vị trí phosphoryl hóa quan trọng và protein kinase A (PKA) là một kinase cụ thể chịu trách nhiệm cho quá trình này. Kết quả này góp phần làm sáng tỏ các cơ chế phân tử tiềm ẩn của bệnh X-EDMD và gợi ý về các con đường truyền tín hiệu có thể tham gia vào việc điều hòa chức năng của emerin.

Mục lục chi tiết:

  • Kết quả
  • Biểu hiện của emerin tái tổ hợp ở người
  • Phân tích phổ khối của emerin tái tổ hợp 1-176
  • Xác định các phosphopeptide ứng viên từ emerin 1 đến 176 bằng cách lập bản đồ khối phổ peptide MALDI-TOF
  • Xác định S49 là vị trí phosphoryl hóa
  • Phosphoryl hóa phụ thuộc protein kinase A của serine 49
  • Thảo luận
  • Quy trình thực nghiệm
  • Biểu hiện tái tổ hợp và tinh sạch emerin người
  • Tạo dựng các bản mã cDNA của emerin, lamin A và C
  • Nuôi cấy tế bào, biến nạp và kháng thể
  • Kính hiển vi miễn dịch huỳnh quang
  • Tổng hợp in vitro emerin được đánh dấu phóng xạ và miễn dịch kết tủa
  • Phân tích bằng phép đo khối phổ