Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 15 trang
Dung lượng: 1 MB

Giới thiệu nội dung

Leishmania Infantum LelF Is an ATP-Dependent RNA Helicase and an elF4A-Like Factor That Inhibits Translation in Yeast

Tác giả: Mourad Barhoumi, N. K. Tanner, Josette Banroques, Patrick Linder, and Ikram Guizani

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Miễn dịch học, Ký sinh trùng học.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích protein LeIF của Leishmania infantum, một protein tương tự yếu tố khởi đầu dịch mã eIF4A của sinh vật nhân chuẩn. Các thí nghiệm sinh hóa và di truyền đã được thực hiện để đánh giá tiềm năng của LeIF như một mục tiêu phát triển thuốc. Kết quả cho thấy LeIF có hoạt tính ATPase phụ thuộc RNA và helicase phụ thuộc ATP. Tuy nhiên, LeIF không thể bổ sung cho sự thiếu hụt gen eIF4A thiết yếu trong nấm men Saccharomyces cerevisiae, và thậm chí còn ức chế sự phát triển của chúng. Các thử nghiệm tương tác cho thấy LeIF có thể tương tác với eIF4G của nấm men, dẫn đến một tương tác không hiệu quả với các yếu tố khởi đầu dịch mã. Đặc biệt, 25 gốc amino đầu N đã được chứng minh là tăng cường khả năng của LeIF trong việc cản trở bộ máy dịch mã ở nấm men.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Keywords
  • Correspondence
  • Abbreviations
  • Results
  • Sequence analysis
  • LeIF protein has an RNA-dependent ATPase activity
  • LelF protein has an ATP-dependent RNA helicase activity in vitro
  • LelF cannot complement the deletion of elF4A
  • LelF protein inhibits cells growth
  • Interaction between LelF protein and GST-elF4G in vitro
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Cloning and mutagenesis
  • Protein expression and purification
  • ATPase assays and analysis
  • Unwinding assay
  • Yeast strains, vectors and genetic manipulation
  • In vitro binding assays
  • Acknowledgements
  • References