Báo cáo khoa học: Ligand binding promotes prion protein aggregation – role of the octapeptide repeats

Ligand binding promotes prion protein aggregation – role of the octapeptide repeats

Tác giả: Shuiliang Yu, Shaoman Yin, Nancy Pham, Poki Wong, Shin-Chung Kang, Robert B. Petersen, Chaoyang Li and Man-Sun Sy

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Bệnh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của các vùng lặp lại octapeptide trong quá trình kết tụ của protein prion (PrP). Các tác giả báo cáo rằng glycosaminoglycan (GAG) và ion đồng (Cu²⁺) có khả năng thúc đẩy sự kết tụ của protein prion tái tổ hợp (rPrP). Đặc biệt, các protein rPrP với số lượng vùng lặp lại octapeptide tăng lên thể hiện khả năng kết tụ cao hơn và hình thành các tập hợp lớn hơn so với protein loại hoang dã. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng vùng lặp lại octapeptide đóng vai trò quan trọng trong quá trình kết tụ rPrP, bất kể tác nhân thúc đẩy là GAG hay Cu²⁺. Tuy nhiên, cơ chế kết tụ do GAG và Cu²⁺ thúc đẩy có những điểm khác biệt, cho thấy có nhiều con đường dẫn đến sự kết tụ của rPrP.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Enhancement of rPrP aggregation with GAG
• Sucrose-gradient centrifugation of rPrP-GAG aggregates
• Enhancement of rPrP aggregation by Cu²⁺ or Zn²⁺ but not Mg²⁺ or Mn²⁺
• Copper enhances aggregation of rPrP and rPrPΔKKRPK, but not rPrPΔ51-90
• Sucrose-gradient centrifugation of rPrP-Cu²⁺ aggregates
• Modulation of GAG- or Cu²⁺-promoted aggregation of rPrP100R with anti-PrP mAbs
• Discussion
• Experimental procedures
• Plasmid construction and recombinant protein preparation
• Antibodies
• Turbidity measurement
• Detection of rPrP binding to heparin
• Detection of biotinylated heparin in the aggregates of rPrPs
• Sucrose-gradient fractionation
• Statistical analysis
• Acknowledgements
• References