Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

The Thioflavin T Fluorescence Assay for Amyloid Fibril Detection Can Be Biased by the Presence of Exogenous Compounds

Tác giả: Sean A. Hudson, Heath Ecroyd, Tak W. Kee, and John A. Carver

Lĩnh vực: Hóa học & Vật lý, Khoa học Sinh học

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này xem xét ảnh hưởng của các hợp chất ngoại sinh, cụ thể là ba polyphenol (curcumin, quercetin và resveratrol), lên phép thử huỳnh quang Thioflavin T (ThT) để phát hiện và định lượng các sợi amyloid. Các polyphenol này, do đặc tính hấp thụ và huỳnh quang của chúng, đã được chứng minh là làm sai lệch đáng kể kết quả đo huỳnh quang ThT. Đặc biệt, curcumin và quercetin có các đặc tính quang phổ trùng lặp với ThT, gây ra hiệu ứng lọc bên trong làm giảm tín hiệu huỳnh quang. Ngay cả ở nồng độ thấp, các hợp chất này cũng có thể can thiệp vào các phép đo ThT. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng resveratrol, mặc dù không hoạt động quang phổ, có thể gây sai lệch thông qua các tương tác phi quang phổ, chẳng hạn như liên kết cạnh tranh với ThT trên các sợi amyloid. Do đó, khi sử dụng ThT trong sự hiện diện của các hợp chất ngoại sinh, việc đánh giá tính khách quan của kết quả là rất quan trọng. Phép thử dịch chuyển quang phổ của Congo red (CR) được đề xuất như một phương pháp thay thế khả thi hơn, vì nó ít bị ảnh hưởng bởi các hợp chất có màu và cho phép định lượng sợi amyloid một cách chính xác hơn sau khi hiệu chỉnh các đóng góp hấp thụ của các chất phụ gia. Tuy nhiên, các phương pháp bổ sung như kính hiển vi điện tử vẫn được khuyến khích để đánh giá sự hình thành sợi một cách độc lập với các phép đo dựa trên thuốc nhuộm.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả: Tác động kết hợp của polyphenol lên sự hình thành sợi amyloid và phép thử ThT tại chỗ theo thời gian thực
  • Tác động hình thái của curcumin, quercetin và resveratrol lên sự hình thành sợi của RCMK-CN với hiệu quả tương tự
  • Hoạt động quang phổ của quercetin và curcumin làm sai lệch huỳnh quang ThT
  • Kỹ thuật phép thử ThT pha loãng không khắc phục được sai lệch quang phổ của polyphenol và cho thấy sự xuất hiện của các hiệu ứng can thiệp phi quang phổ
  • Phép thử dịch chuyển quang phổ thuốc nhuộm CR như một phương pháp thay thế cho ThT
  • Thảo luận
  • Quy trình thực nghiệm
  • Tài liệu tham khảo
  • Thông tin hỗ trợ