Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 265 KB

Giới thiệu nội dung

Phospholipase C, Protein Kinase C, Ca2+/Calmodulin-Dependent Protein Kinase II, and Redox State Are Involved in Epigallocatechin Gallate-Induced Phospholipase D Activation in Human Astroglioma Cells

Tác giả: Shi Yeon Kim, Bong-Hyun Ahn, Joonmo Kim, Yoe-Sik Bae, Jong-Young Kwak, Gyesik Min, Taeg Kyu Kwon, Jong-Soo Chang, Young Han Lee, Shin-Hee Yoon, and Do Sik Min

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Y học

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này khám phá cơ chế EGCG (epigallocatechin-3-gallate), một thành phần chính của trà xanh, tác động lên hoạt động của phospholipase D (PLD) trong tế bào u nguyên bào sợi thần kinh đệm (astroglioma) của con người. Kết quả cho thấy EGCG kích thích mạnh mẽ hoạt động của PLD, một quá trình có liên quan đến sự thay đổi trạng thái oxy hóa khử của tế bào. Cơ chế hoạt động này bao gồm việc kích hoạt con đường tín hiệu PLC-γ1 [Ins(1,4,5)P3-Ca2+]-CaM kinase II-PLD và con đường PLC-γ1 (diacylglycerol)-PKC-PLD. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng Ca2+ ngoại bào và nội bào, cùng với CaM kinase II, đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh hoạt động PLD do EGCG gây ra. Ngoài ra, vai trò của protein kinase C (PKC) trong quá trình này cũng được làm rõ.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Experimental Procedures
  • Materials
  • Cell culture and transfection
  • Measurement of phosphoinositide hydrolysis by PLC
  • PLD assay
  • Subcellular fractionation
  • Digital calcium imaging
  • Immunoprecipitation
  • Immunoblot analysis
  • Confocal immunofluorescence microscopy
  • Detection of intracellular ROS generation
  • Determination of glutathione concentration
  • Results
  • EGCG stimulates PLD activity in U87 human astroglioma cells
  • Role of PLC in EGCG-induced PLD activation
  • EGCG induces translocation of PLC-γ1 and its interaction with PLD1
  • EGCG stimulates [Ca²+]; increases in U87 cells
  • Pretreatment with antioxidants abolishes activation of PLC and PLD induced by EGCG
  • EGCG has pro-oxidant activity in U87 astrocytoma cells
  • EGCG-induced PLD activation is dependent on intracellular or extracellular Ca²+ and mediated by CaM kinase II
  • Involvement of PKC in EGCG-induced PLD activation
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References