Báo cáo khoa học: Tumour necrosis factor-a attenuates insulin action on phosphoenolpyruvate carboxykinase gene expression and gluconeogenesis by altering the cellular localization of Foxa2 in HepG2 cells

Tumour necrosis factor-α attenuates insulin action on phosphoenolpyruvate carboxykinase gene expression and gluconeogenesis by altering the cellular localization of Foxa2 in HepG2 cells

Tác giả: Amit K. Pandey, Vikash Bhardwaj, Malabika Datta

Lĩnh vực: Institute of Genomics and Integrative Biology (CSIR), Delhi, India

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của yếu tố hoại tử khối u alpha (TNFα) trong việc điều hòa hiện tượng này và các cơ chế phân tử tiềm ẩn, đặc biệt là trong các tế bào gan HepG2. Nghiên cứu đã chứng minh rằng TNFα, khi kết hợp với insulin, ngăn chặn sự loại bỏ Foxa2 ra khỏi nhân và làm tăng đáng kể nồng độ của nó trong nhân. Điều này dẫn đến việc Foxa2 liên kết với vùng điều hòa của gen PEPCK. Kết quả cũng cho thấy TNFα làm giảm tác dụng ức chế của insulin đối với biểu hiện của các enzyme gluconeogenic và sản xuất glucose ở gan. Nghiên cứu kết luận rằng Foxa2 đóng vai trò quan trọng, ít nhất là một phần, trong việc làm suy giảm tác dụng của TNFα lên biểu hiện gen PEPCK và sản xuất glucose tại các tế bào HepG2.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Present address
• Structured digital abstract
• Introduction
• Abbreviations
• Effect of TNFa on insulin action on PEPCK expression
• Results
• Incubation of HepG2 cells with TNFα attenuates insulin-stimulated Akt phosphorylation and nuclear exclusion of Foxa2 in HepG2 cells
• TNFα pretreatment increases Foxa2 occupancy on the PEPCK promoter
• Effect of TNFa pretreatment on PEPCK and G6Pase mRNA in HepG2 cells
• TNFα attenuates insulin-induced inhibition of hepatic glucose output in HepG2 cells
• Discussion
• Materials and methods
• Materials
• Cell culture
• Western blotting
• Immunofluorescence microscopy
• Chromatin immunoprecipitation assay
• RNA isolation, RT-PCR and quantitative real-time PCR
• Glucose production assay
• Densitometric analysis
• Statistical analysis
• Acknowledgements
• References