Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 49 trang
Dung lượng: 608 KB

Giới thiệu nội dung

Thiết Kế Vector Biểu Hiện Mang Gen scFv Kháng CD47 Và Biểu Hiện Protein Trong Vi Khuẩn E. coli

Tác giả: Nguyễn Thị Vân Anh

Lĩnh vực: Sinh học thực nghiệm

Nội dung tài liệu:
Luận văn thạc sĩ khoa học này tập trung vào việc thiết kế vector biểu hiện mang gen scFv kháng CD47 và biểu hiện protein tương ứng trong vi khuẩn E. coli. Nghiên cứu này xuất phát từ tầm quan trọng của kháng nguyên CD47 trong điều trị ung thư và tiềm năng của mảnh kháng thể đơn chuỗi (scFv) trong các liệu pháp miễn dịch.

Mục lục chi tiết:

  • Lời cảm ơn
  • Mở đầu
  • Chương 1. Tổng quan tài liệu
    • 1.1. Tổng quan về bệnh ung thư
      • 1.1.1. Ung thư
      • 1.1.2. Ảnh hưởng của bệnh ung thư
      • 1.1.3. Nguyên nhân gây ung thư
    • 1.2. Protein kháng nguyên CD47 và kháng thể kháng CD47
      • 1.2.1. Protein kháng nguyên CD47 – đích trong điều trị ung thư
    • 1.3. Kháng thể và kháng thể đơn chuỗi ứng dụng trong điều trị bệnh ung thư
    • 1.4. Mảnh kháng thể đơn chuỗi (scFv)
  • Chương 2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
    • 2.1. Vật liệu
      • 2.1.1. Hóa chất và sinh phẩm
    • 2.2. Thiết bị
    • 2.3. Các phương pháp
      • 2.3.1. Nhân gen mã hóa scFv kháng CD47 bằng phản ứng PCR
      • 2.3.2. Điện di trên gel agarose
      • 2.3.5. Gắn nối sản phẩm PCR vào vector pET22b+
      • 2.3.6. Biến nạp sản phẩm gắn nối vào tế bào khả biến E.coli DH5a bằng phương pháp sốc nhiệt
      • 2.3.7. Tách plasmid từ vi khuẩn E.coli theo phương pháp mini-prep của Sambrook
      • 2.3.8. Chọn dòng plasmid tái tổ hợp mang gen antiHer2 bằng phương pháp PCR
      • 2.3.9. Quy trình biểu hiện kháng thể kháng CD47 ở hệ thống biểu hiện E.coli
      • 2.3.10. Quy trình điện di protein SDS-PAGE
      • 2.3.11. Tinh sạch kháng thể anti-CD47 tái tổ hợp bằng phương pháp sắc ký ái lực với Ni-NTA resin
      • 2.3.12. Nuôi cấy dòng tế bào Jurkat
      • 2.3.13. Phương pháp miễn dịch huỳnh quang
  • Chương 3. Kết quả
    • 3.1. Kết quả nhân gen mã hóa kháng thể kháng CD47
    • 3.2. Kết quả thiết kế vector biểu hiện tái tổ hợp pET22b+ mang gen anti-CD47
      • 3.2.1. Cắt vector pET22b+ và sản phẩm PCR bằng enzyme cắt giới hạn
      • 3.2.2. Kết quả gắn tạo thành công vector tái tổ hợp mang gen anti-CD47
    • 3.3. Kết quả biểu hiện gen mã hóa kháng thể kháng CD47 ở hệ thống biểu hiện E. coli
    • 3.4. Kết quả tinh sạch kháng thể anti-CD47
    • 3.5. Xác định khả năng liên kết đặc hiệu của kháng thể anti-CD47 với kháng nguyên CD47
  • Kết luận
  • Tài liệu tham khảo