Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 269 KB

Giới thiệu nội dung

The Metabolic Role and Evolution of L-arabinitol 4-dehydrogenase of Hypocrea jecorina

Tác giả: Manuela Pail, Thomas Peterbauer, Bernhard Seiboth, Christian Hametner, Irina Druzhinina and Christian P. Kubicek

Lĩnh vực: Sinh hóa, Di truyền học vi sinh vật

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò trao đổi chất và tiến hóa của enzyme L-arabinitol 4-dehydrogenase (Lad1) trong nấm Hypocrea jecorina (còn gọi là Trichoderma reesei). Enzyme này được xác định là có liên quan đến quá trình chuyển hóa L-arabinose, D-xylose và D-galactose. Nghiên cứu đã sản xuất tái tổ hợp enzyme Lad1 trong Escherichia coli và xác định đặc tính của nó. Kết quả cho thấy Lad1 có khả năng oxy hóa các pentitol và một số hexitol, tạo ra các sản phẩm keto tương ứng. Phân tích phát sinh chủng loại của Lad1 cho thấy nó thuộc một nhánh cuối của các enzyme arabinitol dehydrogenase ở nấm, tách biệt trong quá trình tiến hóa của sorbitol dehydrogenase (SDH). Nghiên cứu cũng so sánh cấu trúc 3D của Lad1 và SDH, chỉ ra những thay đổi axit amin tại vùng lân cận túi liên kết cơ chất, có thể giải thích sự khác biệt về hiệu quả xúc tác và ái lực với các cơ chất khác nhau. Các thí nghiệm trên chủng đột biến lad1 đã xác nhận vai trò thiết yếu của enzyme này trong quá trình chuyển hóa L-arabinose và một số hexose ở nấm.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Quy trình thực nghiệm
  • Nuôi cấy và điều kiện nuôi
  • Xác định sự phát triển của nấm
  • Nhân dòng gen lad1 của H. jecorina và xây dựng chủng đột biến mất chức năng lad1
  • Biểu hiện quá mức của lad1 trong E. coli và tinh sạch Lad1
  • Đo hoạt tính enzyme
  • Sản xuất quy mô lớn hexitol và hexulose bởi Lad1
  • Phân tích hóa học
  • Phân tích phát sinh chủng loại
  • Kết quả
  • Lad1 oxy hóa galactitol thành L-xylo-3-hexulose
  • Chuyển hóa enzyme của hexitol và ketohexose bởi Lad1
  • Lad1 là phiên bản nấm của SDH ở động vật có vú bậc cao
  • Các axit amin thiết yếu cho việc liên kết D-sorbitol được bảo tồn trong Lad1
  • Thảo luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo