Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 19 trang
Dung lượng: 349 KB

Giới thiệu nội dung

Talin 2 is a large and complex gene encoding multiple transcripts and protein isoforms

Tác giả: Emmanuel Debrand, Yasmine El Jai, Lorraine Spence, Neil Bate, Uta Praekelt, Catrin A. Pritchard, Susan J. Monkley and David R. Critchley

Lĩnh vực: Department of Biochemistry, University of Leicester, UK

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này trình bày một phân tích chi tiết về gen talin 2 ở động vật có vú. Phát hiện của chúng tôi cho thấy sự tồn tại của một promoter mới chưa được biết đến, liên quan đến một đảo CpG và cách xa exon mã hóa đầu tiên bởi nhiều exon không mã hóa được ghép nối thay thế, trải dài hơn 200 kb. Phân tích một dòng chuột có gen trap cho thấy promoter này chịu trách nhiệm cho phần lớn biểu hiện của talin 2 trong các mô trưởng thành. Ngoài ra, chúng tôi chứng minh rằng tinh hoàn và thận biểu hiện các dạng thức protein talin 2 bị cắt ngắn thiếu một nửa phần N-terminal của protein. Nghiên cứu cũng cung cấp bằng chứng về biểu hiện được điều chỉnh theo sự phát triển của dạng thức talin 2 ngắn đặc hiệu cho tinh hoàn trong các tế bào sinh tinh đang kéo dài. Cuối cùng, chúng tôi xác định bốn sự kiện ghép nối thay thế đặc hiệu cho mô trong vùng mã hóa của talin 2.

Mục lục chi tiết:

  • Talin 2 là một gen lớn và phức tạp mã hóa nhiều bản phiên mã và các dạng thức protein
  • Talin 2 là một gen lớn và phức tạp mã hóa nhiều bản phiên mã và các dạng thức protein
  • Gen talin 2 của chuột trải dài 414 kb và chứa nhiều exon 5′ không mã hóa
  • Gen talin 2 của chuột trải dài 414 kb và chứa nhiều exon 5′ không mã hóa
  • Promoter tối thiểu được bảo tồn liên quan đến đảo CpG
  • Sự phiên mã từ đảo CpG chiếm phần lớn sự biểu hiện của talin 2 trong các mô trưởng thành
  • Dạng thức talin 2 bị cắt ngắn được biểu hiện đặc hiệu trong các tế bào sinh tinh đang kéo dài của tinh hoàn trưởng thành
  • Một bản phiên mã talin 2 ngắn thứ hai được biểu hiện mạnh mẽ ở thận
  • Ghép nối thay thế các exon mã hóa của Tln2
  • Nghiên cứu và phân tích cDNA
  • Dự đoán promoter
  • Chiết xuất RNA
  • RNA người, northern blot mô và thư viện cDNA thận
  • Phiên mã ngược
  • PCR
  • RT-PCR định lượng thời gian thực
  • Tế bào ES gene trap
  • Tạo chuột biến đổi gen và kiểu gen
  • Ly trích protein từ mô và western blotting
  • Cryosections và nhuộm X-gal
  • Phân tích và nhuộm X-gal ống sinh tinh
  • Tài liệu bổ sung