Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 15 trang
Dung lượng: 2 MB

Giới thiệu nội dung

Synthesis and Structural Characterization of a Mimetic Membrane-Anchored Prion Protein

Tác giả: Matthew R. Hicks, Andrew C. Gill, Imanpreet K. Bath, Atvinder K. Rullay, Ian D. Sylvester, David H. Crout, Teresa J. T. Pinheiro

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày quá trình tổng hợp và đặc tính cấu trúc của một protein prion được neo vào màng tế bào bằng một chất tương tự neo màng GPI (GPIm). Mục tiêu là để hiểu rõ hơn về vai trò của việc neo màng trong cấu trúc và cơ chế chuyển đổi của protein prion (PrP), đặc biệt là trong bối cảnh bệnh não xốp truyền nhiễm (TSEs). Các nhà nghiên cứu đã tổng hợp một phức hợp PrP-GPIm và tái lập thể nó vào các màng lipid mô hình. Kết quả cho thấy cấu trúc của PrP-GPIm trong màng tương tự như cấu trúc của PrP neo màng tự nhiên, cung cấp bằng chứng thực nghiệm cho thấy các cấu trúc đã biết của dạng PrP hòa tan không neo màng có thể đại diện cho cấu trúc của PrP neo màng.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Results
  • Expression, purification and refolding of PrP-S231C
  • Coupling of PrP-React to GPIm
  • Reconstitution of PrP-GPIm into membranes
  • CD spectroscopy
  • ATR FTIR
  • Discussion
  • Membrane-anchored PrP has a similar structure to soluble anchorless PrP
  • Prion conversion and membranes
  • Experimental procedures
  • Expression and purification of PrP
  • Oxidation of reduced PrP-S231C
  • Synthesis of the mimetic GPI anchor
  • Coupling reaction between PrP-React and GPIm
  • Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS)
  • Liposome preparation
  • Reconstitution of PrP-GPIm into liposomes
  • CD spectroscopy
  • ATR FTIR
  • Acknowledgements
  • References