Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 755 KB

Giới thiệu nội dung

Structure of the complex of a yeast glucoamylase with acarbose reveals the presence of a raw starch binding site on the catalytic domain

Tác giả: Jozef Ševčík, Eva Hostinová, Adriana Solovicová, Juraj Gašperík, Zbigniew Dauter, Keith S. Wilson

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Tinh thể học cấu trúc

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày cấu trúc của enzyme glucoamylase từ nấm men Saccharomyces fibuligera, bao gồm cả dạng enzyme tự do và dạng phức hợp với acarbose, ở độ phân giải nguyên tử. Phát hiện quan trọng là sự hiện diện của một vị trí liên kết thứ hai, cách xa vị trí xúc tác, được đề xuất là nơi enzyme liên kết với tinh bột thô. Vị trí này bao gồm các gốc axit amin đóng vai trò quan trọng trong việc bám dính vào tinh bột thô. Các thí nghiệm đột biến gen xác nhận vai trò của các gốc axit amin này trong việc liên kết với tinh bột thô, cho thấy rằng enzyme glucoamylase này có một trang web liên kết tinh bột riêng biệt nằm trên miền xúc tác.

Mục lục chi tiết:

  • Mô tả cấu trúc
  • Độ chính xác của các mô hình
  • Các cấu trúc tinh thể của glucoamylase
  • Vị trí liên kết tinh bột thô
  • Các đột biến tại vị trí liên kết ligand từ xa
  • Thí nghiệm in vitro
  • Chuẩn bị và tinh sạch enzyme
  • Điện di gel Polyacrylamide
  • Phân tích liên kết với tinh bột thô
  • Hoạt tính enzyme
  • Tinh thể hóa, thu thập dữ liệu và xử lý
  • Xác định và tinh chỉnh cấu trúc