Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 175 KB

Giới thiệu nội dung

Selective Release and Function of One of the Two FMN Groups in the Cytoplasmic NAD+-Reducing [NiFe]-Hydrogenase from Ralstonia Eutropha

Tác giả: Eddy van der Linden, Bart W. Faber, Boris Bleijlevens, Tanja Burgdorf, Michael Bernhard, Bärbel Friedrich, and Simon P. J. Albracht

Lĩnh vực: Biochemistry, Microbiology, Life Sciences

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào enzyme [NiFe]-hydrogenase hòa tan, có khả năng khử NAD+ từ vi khuẩn Ralstonia eutropha. Enzyme này bao gồm hai nhóm FMN. Nghiên cứu phát hiện rằng một trong hai nhóm FMN (FMN-a) có thể được giải phóng một cách chọn lọc khi enzyme bị khử bởi NADH trong thời gian dài. Sự giải phóng FMN-a này dẫn đến mất hoạt tính H2-NAD+ của enzyme, trong khi hoạt tính NADH-dehydrogenase vẫn được duy trì. Điều này gợi ý rằng FMN-b đóng vai trò quan trọng trong hoạt tính NADH-dehydrogenase, còn FMN-a thì cần thiết cho phản ứng H2-NAD+ và sự kích hoạt nhanh chóng của trung tâm hoạt động Ni-Fe.

Mục lục chi tiết:

  • Selective release and function of one of the two FMN groups in the cytoplasmic NAD+-reducing [NiFe]-hydrogenase from Ralstonia eutropha
  • Materials and methods
  • Enzyme purification
  • Activity measurements
  • Electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy
  • FMN determination
  • Determination of the apparent molecular mass by size-exclusion chromatography
  • Results and discussion
  • Effect of reduction of the SH on its H2-NAD+ and H2-BV activities
  • Release of FMN from the reduced enzyme
  • Kinetics of the release of FMN induced by reduction with NADH
  • Recovery of the H2-NAD+ activity by addition of FMN
  • Integrity of the SH during the release of FMN-a
  • The role of the FMN-a group in activation of the SH
  • Conclusions
  • Acknowledgements
  • References