Báo cáo khoa học: Ribosomal protein L22 inhibits regulation of cellular activities by the Epstein-Barr virus small RNA EBER-1

Ribosomal protein L22 inhibits regulation of cellular activities by the Epstein-Barr virus small RNA EBER-1

Tác giả: Androulla Elia, Jashmin Vyas, Kenneth G. Laing, and Michael J. Clemens

Lĩnh vực: Translational Control Group, Department of Basic Medical Sciences, St George’s Hospital Medical School, London, UK

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của protein ribosome L22 trong việc điều hòa hoạt động tế bào bởi RNA nhỏ EBER-1 của virus Epstein-Barr (EBV). EBER-1 là một RNA nhỏ được biểu hiện dồi dào, có khả năng ức chế protein kinase R (PKR) và ngăn chặn sự hoạt hóa của nó bởi RNA sợi đôi (dsRNA). EBV là tác nhân gây ung thư và có khả năng chống chết tế bào theo chương trình đối với tế bào lympho B. Nghiên cứu này cho thấy protein ribosome L22 cạnh tranh với PKR để gắn vào một vị trí chung trên EBER-1. Sự cạnh tranh này làm suy yếu khả năng của EBER-1 trong việc ức chế sự hoạt hóa của PKR bởi dsRNA. Ngoài ra, L22 còn ngăn chặn cả các tác động phụ thuộc và không phụ thuộc PKR của EBER-1. Kết quả này gợi ý rằng sự kết hợp của L22 với EBER-1 trong các tế bào bị nhiễm EBV có thể làm suy giảm các tác động sinh học của RNA virus, bao gồm cả việc ức chế PKR và các cơ chế khác mà EBER-1 kích thích biểu hiện gen.

Mục lục chi tiết:

• Abstract
• Introduction
• Materials and methods
• Materials
• Preparation of purified PKR
• Preparation and purification of recombinant L22
• In vitro synthesis of EBER-1
• Preparation of 32P-labelled poly(I).poly(C)
• UV cross-linking assays for EBER-1-protein interactions
• Poly(I).poly(C)-binding assays
• Measurement of PKR activation
• Transient transfection of murine embryonic fibroblasts
• Results
• Competition between L22 and PKR for EBER-1
• Effects of EBER-1 and L22 on reporter gene expression
• Discussion
• Acknowledgements
• References